[发明专利]尿液外泌体蛋白作为病毒性肺炎诊断标志物的应用

说明书

本发明提供了一种尿液外泌体蛋白作为病毒性肺炎诊断标志物的应用，所述尿液外泌体蛋白包括ANPEP，ASAH1，COL11A1，EHD4，HEXB，LGALS3BP，SERPINA1，SERPING1中的一种或几种的组合。通过将提取到的尿液外泌体用于基于蛋白质的病毒性肺炎相关标志物的检测，能够实现病毒性肺炎的有效诊断。

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，尤其涉及一种尿液外泌体蛋白作为病毒性肺炎诊断标志物的应用。

背景技术

病毒性肺炎是由上呼吸道病毒感染、向下蔓延所致的肺部炎症，一般临床表现为干咳、发热等症状。支原体肺炎是由肺炎支原体感染所引起的下呼吸道感染，它的临床表现最常见的症状是发热和咳嗽。由于病毒性肺炎和支原体肺炎的表征相似，因此，临床上需要辅助检查来帮助诊断。

病毒性肺炎的诊断方法有临床表现、胸部X线和病原学检查几种。现有技术中，病毒性肺炎的诊断依据主要是临床表现和胸部X线表现，肺纹理增多和肺部浸润可以作为诊断的依据，但真正的确诊需要采用病原学检查以排除其他病原体。临床经验认为间质肺浸润提示病毒性感染，肺泡性浸润提示细菌感染，然而根据胸部X线区分细菌性和肺细菌性肺炎很不敏感，胸片不能鉴别不同病原的肺炎，确诊有赖于病原学的检查，包括病毒分离、抗原抗体检测、血清学检查以及血常规。病毒分离需要收集下呼吸道分泌物，采样困难，被污染几率太大，并且病毒感染低水平下不易检出。特异性抗原抗体检测和血清学检查需多次抽血，耗时较长，仅能作为回顾性诊断，并无早期诊断价值。血常规的参数只是经验性判断，既不敏感，也非特异。

目前，无论发达国家或发展中国家，病毒性肺炎初始治疗均是经验性的，而对于常使用的检测病毒性肺炎的方法中，临床表现和胸部X线表现更多只能依靠经验进行判断，并没有正规的依据，无法进行推广，而病原学检查采样困难，且容易被污染，并且过程繁琐，耗费时间长，对病毒性肺炎的诊断也起不到太大的作用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种尿液外泌体蛋白的应用，通过试剂盒对尿液外泌体进行快速提取，将提取到的尿液外泌体用于基于蛋白质的病毒性肺炎相关标志物的检测，实现病毒性肺炎的有效诊断。

为了实现上述目的，本发明特采用以下技术方案：

本发明涉及尿液外泌体蛋白的定量检测剂在制备用于病毒性肺炎诊断的试剂盒中的应用。

发明人通过沉淀法试剂盒提取尿液外泌体，通过对尿液外泌体蛋白组学主成分分析，发现了在病毒性与支原体肺炎组和健康组间存在显著差异的八种蛋白，分别为ANPEP，ASAH1，COL11A1，EHD4，HEXB，LGALS3BP，SERPINA1，SERPING1，其中：

ANPEP蛋白是一种膜结合锌依赖性的糖蛋白，参与细胞识别和各种肽的加工，在血管生成、促进胆固醇结晶以及在氨基酸转运中发挥作用，其位于小肠肾微绒毛膜中中，用于胃和胰蛋白酶水解蛋白产生的肽的最终消化，其可以作为人类冠状病毒229E/HCoV-229E的受体，而229E/HCoV-229E可以引起人体的呼吸道症状。

ASAH1蛋白能够接到钙诱导的表皮角质形成细胞分化，间接调节肿瘤坏死因子诱导的凋亡，也能起到类固醇生成调节器的作用，同时还可以C12-神经酰胺具有更好的催化效率，允许从脂肪酸和鞘氨醇合成神经酰胺，而神经酰胺能够调节角质层水分的平衡，保持皮肤的水分，同时ASAH1蛋白与人体的代谢也有极大的关联。

COL11A1蛋白是基底膜网状结构的主要组成成分，在细胞内合成后直接以前胶原参与细胞外间质的构成，可以控制前胶原分子的细胞内组装和胶原原纤维的细胞外组装，在组织生长和修复中发挥关键作用，参与蛋白多糖代谢。

EHD4蛋白是ATP和膜结合蛋白，能在ATP水解时控制膜重组或微管化。在早期内体转运中起作用，可以参加细胞的内吞循环，也就是说其可以影响细胞外的物质通过膜内陷和内化进入细胞的过程。