[发明专利]一种融合蛋白及其改性纤维素与制备方法

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包含可结合至纤维素的蛋白。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述可结合至纤维素的蛋白包含CBM家族蛋白；

优选地，所述CBM家族蛋白包括CBM2、CBM3蛋白中的至少一种；

优选地，所述可结合至纤维素的蛋白选自CBM3蛋白序列。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包含NT区、CT区、重复区域中的至少一种；

优选地，所述融合蛋白包含第一CBM家族蛋白、NT区、重复区、CT区、第二CBM家族蛋白；

优选地，从N端到C端，所述融合蛋白依次包含第一CBM家族蛋白、NT区、重复区、CT区、第二CBM家族蛋白；

优选地，所述重复区包括但不限于蛛丝MaSp1重复区、蛛丝蛋白MaSp4重复区、蛛丝蛋白AcSp重复区、蛛丝蛋白PySp重复区、蜂丝蛋白结构区中的至少一种；

优选地，所述第一CBM家族蛋白与第二CBM家族蛋白相同；

优选地，CBM2包含SEQ ID No.17所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，CBM3包含SEQ ID No.3所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述蛛丝MaSp1重复区包含SEQ ID No.6所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述蛛丝蛋白MaSp4重复区包含SEQ ID No.8所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述蛛丝蛋白AcSp重复区包含SEQ ID No.9所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述蛛丝蛋白PySp重复区包含SEQ ID No.10所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述蜂丝蛋白结构区包含SEQ ID No.11所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，NT包含SEQ ID No.4所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，CT包含SEQ ID No.7所示氨基酸序列或与其至少具有90％相似性的序列；

优选地，所述融合蛋白还包含接头；

优选地，所述接头包含如下氨基酸序列中的至少一种：

GSGGGS；

GNS；

GGGGS；

GKL；

优选地，所述第一CBM家族蛋白与NT区之间、所述NT区与重复区之间、所述重复区与CT区之间、所述CT区与第二CBM家族蛋白之间均具有接头。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述纤维素包含微生物生产的纤维素、植物来源的纤维素中的至少一种；

优选地，所述微生物生产的纤维素包含细菌纤维素。

5.一种改性纤维素，其特征在于，所述改性纤维素包含凝聚蛋白以及纤维素。

6.如权利要求5所述的改性纤维素，其特征在于，所述凝聚蛋白包含蛛丝蛋白、蜂丝蛋白、胶原蛋白、肌肉纤维蛋白、贻贝黏蛋白、花药黏蛋白、蜗牛黏蛋白、章鱼黏蛋白中的至少一种；

优选地，所述凝聚蛋白包含权利要求1～4任意一项所述融合蛋白；

优选地，所述纤维素包含细菌纤维素。

7.分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1～4任意一项所述融合蛋白。

8.一种构建体，其特征在于，所述构建体含有权利要求7所述多核苷酸。

9.一种表达系统，其特征在于，所述表达系统含有如权利要求8所述构建体或基因组中整合有外源的如权利要求7所述多核苷酸。

10.如权利要求5或6所述改性纤维素的制备方法，其特征在于，包括：将凝聚蛋白与纤维素混合，制得所述改性纤维素。

11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述凝聚蛋白与所述纤维素的质量比为(0.05～0.06)g：(0.5～10)mg；

优选地，所述凝聚蛋白与所述纤维素的质量比为(0.05～0.06)g：(0.5～5mg)；

优选地，凝聚蛋白与纤维素混合后，静置时间≥20min，优选为30min；

优选地，还包括一次浸泡步骤，包括将凝聚蛋白与纤维素混合后，得到混合物，将所得的混合物浸泡于第一浸泡液中，制得一次浸泡物；

优选地，所述第一浸泡液包括异丙醇、乙醇、甲醇、正丁醇、甲酸、乙酸中的至少一种；

优选地，一次浸泡的时间≥20min；

优选地，还包括二次浸泡步骤，包括将一次浸泡物浸泡于第二浸泡液中，制得第二浸泡物；

优选地，第二浸泡液包括甘油水溶液；

优选地，所述甘油水溶液中甘油的质量百分数为1～10％；

优选地，二次浸泡的时间≥12h，优选为20-24h；

优选地，还包括三次浸泡步骤，包括将二次浸泡物浸泡于第三浸泡液中，制得第三浸泡物；

优选地，第三浸泡液包括含表面活性剂的清洁剂或其水溶液；

优选地，所述含表面活性剂的清洁剂包括肥皂、洗手液、洗洁精中的至少一种优选地，三次浸泡的时间≥30min。