[发明专利]一种仿生神经移植物及其制备方法

权利要求书

1.一种仿生神经移植物，其特征在于，包括螺旋支架、纳米纤维膜、导向纤维和hBMSC-ECM，所述纳米纤维膜包覆于螺旋支架表面，所述导向纤维和hBMSC-ECM内置于螺旋支架管腔中，所述螺旋支架、纳米纤维膜和导向纤维的原料均为壳聚糖。

2.根据权利要求1所述的仿生神经移植物，其特征在于，所述螺旋支架的内径为1~6mm，长度为1~6cm，螺距为0.5~5mm。

3.根据权利要求1所述的仿生神经移植物，其特征在于，所述导向纤维的长度为1~3cm，数量为3~28根。

4.一种权利要求1~3任一项所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

以壳聚糖为原料，采用模具浇筑的方式制备螺旋支架；

以壳聚糖为原料，采用静电纺丝法在螺旋支架表面包覆一层纳米纤维膜，得到表面包覆纳米纤维膜的螺旋管；

以壳聚糖为原料，采用模板法制备导向纤维；

在表面包覆纳米纤维膜的螺旋管内部填充导向纤维和hBMSC-ECM，即得仿生神经移植物。

5.根据权利要求4所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述螺旋支架的制备步骤包括：

配制浓度为4wt%~7wt%的壳聚糖溶液；

将壳聚糖溶液浇注在带有螺纹的内芯模具上；

将带有壳聚糖溶液的内芯模具置于5~20%的NaOH溶液中固化定型，然后用水清洗、干燥、脱模，得到螺旋支架半成品；

将螺旋支架半成品浸入含5wt%甲醇的乙酸酐溶液中乙酰化6h，然后采用5~20%的NaOH溶液在室温下固定12h，清洗晾干，即得螺旋支架。

6.根据权利要求4所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述表面包覆纳米纤维膜的螺旋管的制备步骤包括：

配制总浓度为3wt%~5wt%的壳聚糖与聚环氧乙烷的共混溶液，其中壳聚糖与聚环氧乙烷的质量比为100：5~20；

将壳聚糖与聚环氧乙烷的共混溶液置于静电纺丝装置中，将螺旋支架置于管状的接收装置上，进行静电纺丝，在螺旋支架表面包覆一层纳米纤维膜；

将包覆纳米纤维膜的螺旋支架置于5~20%的NaOH溶液中固化定型，然后用水清洗去除聚环氧乙烷，即得表面包覆纳米纤维膜的螺旋管。

7.根据权利要求6所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述静电纺丝的设置参数包括：电压为5~35kV，流速为0.1~2mL/h，接收距离为5~35cm，接收装置的转速为5~150rmp。

8.根据权利要求4所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述导向纤维的制备步骤包括：

配制浓度为4wt%~7wt%的壳聚糖溶液；

将壳聚糖溶液浇注在带有凹槽的模具中；

将带有壳聚糖溶液的模具放入5~20%的NaOH溶液中固化定型，然后用水清洗、干燥、脱模，即得导向纤维。

9.根据权利要求8所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述模具的凹槽包括连通的内凹槽和外凹槽，连通的内凹槽和外凹槽的横截面形状为倒置的品字形，所述外凹槽的宽度为100~500μm，所述外凹槽的高度为20~50μm，所述内凹槽的宽度与外凹槽的高度相同，所述内凹槽的高度为25~240μm，所述外凹槽的宽度为两倍内凹槽的高度与内凹槽的宽度之和，所述内凹槽和外凹槽的长度相同，均为1~3cm。

10.根据权利要求4所述的仿生神经移植物的制备方法，其特征在于，所述hBMSC-ECM的制备步骤包括：

以DPBS溶液稀释100倍的MSC贴壁试剂包被培养皿；

将复苏后的hBMSC种植于包被后的培养皿上，加入完全培养基，于37℃、5% CO₂培养箱中培养，每2天更换一次培养基；

待细胞饱和度达到80%时，换用含抗坏血酸的完全培养基，每2天避光换液一次，10天后弃去培养液，DPBS清洗3次以上后，以超纯水在37℃下低渗10min，然后去除超纯水，加入细胞裂解液反应5min，采用DPBS清洗，清洗后用DNA酶在37℃下反应2h，最后用DPBS清洗，4℃下保存。