[发明专利]桃MIR6288b在调控植物分枝数量中的应用

说明书

本发明公开了桃MIR6288b在调控植物分枝数量中的应用，所述MIR6288b基因的前体序列如SEQ ID NO.1所示，成熟序列miR6288b‑5p如SEQ ID NO.2所示，成熟序列miR6288b‑3p如SEQ ID NO.3所示。本发明通过克隆桃MIR6288b构建过表达载体，用农杆菌介导的遗传转化法转入拟南芥中验证MIR6288b的功能，与野生型植株相比，转基因植株分枝数量显著增多，有利于从分子水平上阐明有关桃树发枝量方面的分子机制，从而可辅助选育分枝数量少，适宜于省力化栽培的桃新品种，还可以应用于植物分枝数量遗传改良方面的研究。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及桃MIR6288b以及在调控植物分枝数量中的应用。

背景技术

桃生产上主栽品种为普通型，其树型开张，分枝多，分枝角度大，随着结果年限的延长，营养生长旺盛，树体枝繁叶茂，最终造成树冠郁蔽，不仅影响透光率、果实品质的提升、加重病虫害的发生几率，还极大增加了夏剪和冬剪人工成本。国家桃产业技术体系栽培研究室统计结果表明劳动力成本已占到桃生产成本的一半以上，而人工修剪是人工投入的最主要部分。因此，为实现桃省力化栽培，对桃树树型调控机制解析迫在眉睫。

植物microRNA是一类由内源MIR基因编码的颈环结构，在DICER-LIKE1(DCL1)酶的剪切作用下形成的长度约19～24个核苷酸的小分子单链非编码RNA，可以通过碱基互补配对的方式识别靶基因mRNA，并在转录水平或转录后水平调控基因的表达。miRNA在植物的分枝形成过程中发挥重要的调控作用。miR319靶定并降解AtTCP4以保证拟南芥根的正常生长；棉花miR164通过靶定基因GhCUC2的方式调节内源ABA含量并调节棉花分枝形成；水稻miR167a通过靶定生长素响应因子OsARF12/17/25的方式调控生长素再分布并调节水稻分蘖角度。但目前调控分枝数量的miRNA却鲜有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供桃(Prunus persica L.)MIR6288b以及在调控植物分枝数量中的应用。

为了实现上述目的，本发明的技术方案概述如下：

桃MIR6288b的前体序列如SEQ ID NO.1所示，成熟序列miR6288b-5p如SEQ IDNO.2所示，成熟序列miR6288b-3p如SEQ ID NO.3所示。

本发明最主要的目的在于提供上述桃MIR6288b或与MIR6288b相关的生物材料的应用。具体表现为所述桃MIR6288b能够增加植物分枝数量，因此，通过抑制目的植物中MIR6288b的表达可辅助选育分枝数量少，适宜于省力化栽培的桃新品种，在植物分枝数量遗传改良方面起着重要的作用。

“抑制目的植物中的MIR6288b的表达”的实现方式可以通过敲除MIR6288b的方式来实现，具体的，可以通过基因编辑的方式获得MIR6288b缺失的突变体植物。可通过将所述植物细胞再生成植物，获得MIR6288b缺失的突变体植物。并利用农杆菌转化法将重组质粒转入植物中。

本发明中所述生物材料可以为含有所述MIR6288b的表达盒、重组载体、重组微生物、转基因植物细胞系、组织或器官，还可以为含有所述表达盒的重组载体、重组微生物、转基因植物细胞系、组织或器官。

本发明中，对于适用于本发明的植物没有特别的限制，只要其适合进行基因的转化操作，如各种农作物、花卉植物或林业植物等。所述的植物比如可以是(不限于)：双子叶植物、单子叶植物、木本植物、蔷薇目植物、蔷薇科植物、桃属、桃、十字花科植物、拟南芥属植物、拟南芥等。

本发明中所说的“植物”包括整株植物，其亲本和子代植株以及植物的不同部位，包括种子、果实、芽、茎、叶、根(包括块茎)、花、组织和器官，在这些不同的部分均有我们目的基因或者核酸。这里所提及的“植物”也包括植物细胞、悬浮培养物、愈伤组织、胚、分生组织区、配子体、孢子体、花粉和小孢子，同样，其中每种前述对象包含目的基因/核酸。