[发明专利]一种草酸青霉菌0710-26及其应用

说明书

本发明属于微生物领域，公开了一种高效抑藻活性的草酸青霉菌0710‑26及其应用。所述的草酸青霉菌0710‑26由大亚湾海水中分离纯化获得原始菌株。经中国普通微生物菌种保藏管理中心鉴定，分类命名为草酸青霉菌，保藏编号为CGMCC No.40217。本发明通过草酸青霉菌0710‑26液体发酵后获得大量菌体，本发明的草酸青霉菌0710‑26是高效抑藻微生物，具有较大的应用价值。

技术领域

本发明涉及环境治理微生物领域，具体涉及一种草酸青霉菌0710-26及其应用。

背景技术

人类的生产及生活产生污水，营养了海洋的水体，从而使得水体富营养化，在温度达到藻类生长需求时，藻类及其他浮游生物将迅速繁殖生长，海洋即出现赤潮。赤潮爆发时，主要的藻类多种多样。其中，球形棕囊藻也是赤潮的一种主要藻类。球形棕囊藻爆发时将产生丙烯酸类物质，该类物质对于鱼类及水生甲壳均有一定的毒性，给当地的水产养殖业造成极大的危害。同时，球形棕囊藻爆发时会形成囊体，大的囊体会堵塞沿岸核电站冷源用水拦网，从而影响核电站的安全运行。

目前针对藻类引起的赤潮常采用化学及物理方法处理。化学方法处理藻类使用的试剂：金属试剂、光敏剂、除草剂和其他化学物质等。物理方法一般指超声技术、紫外线照射及吸附方法对藻类的控制方法。物理和化学方法可以有效去除藻类。然而，它们有明显的缺点，如成本高、二次污染和对水生生物和人类的有毒性。以微生物为基础的抑藻处理方法，安全、环保。

草酸青霉属于真菌，广泛存在于自然界中，具有可有诱导抗性、分泌酶解类物质等特性。通过代谢能产生抗真菌物质，能抑制多种病原真菌的生长。例如：能拮抗菌核病菌、抑制菌核病菌菌丝的生长。最新研究报道草酸青霉还具有溶磷、降解农药的功能，同时具有促生和改善农产品品质的作用。目前，在富营养化水体中有害藻类治理方面应用较少。

发明内容

本发明的目的在于提供一种草酸青霉菌0710-26及其应用。

本发明第一目的在于提供一种自主筛选的具有高抑藻活性的草酸青霉菌0710-26，分类命名为草酸青霉菌 Penicilliutn oxalicum，该菌株已于2022年6月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.40217。

本发明所述的草酸青霉菌0710-26是从大亚湾海水中分离纯化获得的原始菌株，所述的草酸青霉菌0710-26的筛选方法包括以下步骤：

（1）取大亚湾区域海水，采用无菌水对海水进行梯度稀释：10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶，每个梯度稀释液取0.1ml涂布在改良马丁培养基上，30℃培养5-7天；

（2）挑取不同菌落，划线于改良马丁培养基上，置于30℃培养3-5天；观察分离菌落是否纯化，若有杂菌，重复该步骤直至纯培养；

（3）将上述纯化后的菌株接种于液体培养基中，50-100rpm，30℃振荡培养3-5天；

（4）取1ml上述菌液接种于20ml指数生长的球形棕囊藻培养液中，于20±1℃，12h光照，12h黑暗，2400lux光照强度条件下，培养2天，改良马丁培养基为对照加入藻液中，分别设置3个平行，检测叶绿素a含量，判断藻细胞的数量，从而筛选出有抑藻活性最强菌株为草酸青霉菌0710-26。

其中，所述改良马丁培养基组分包括：酵母蛋白胨5.0g，酵母浸出粉 2.0g，葡萄糖20.0g，磷酸氢二钾 1.0g，硫酸镁 0.5g，琼脂14.0g，纯化水1000ml。

所述液体培养基组分包括：酵母蛋白胨5.0g，酵母浸出粉 2.0g，葡萄糖 20.0g，磷酸氢二钾 1.0g，硫酸镁 0.5g，纯化水1000ml。