[发明专利]Tim-4调控胆固醇合成中的应用

说明书

本发明属于分子生物学和生物医学技术领域，具体涉及Tim‑4调控胆固醇合成中的应用。本发明通过研究发现，Tim‑4作为巨噬细胞胆固醇合成的正向调控因子，促进巨噬细胞内胆固醇的积累。Tim‑4结合SCAP和Insig1，抑制Tim‑4与SCAP和Insig1的结合，促进SREBP2从内质网到高尔基体的转位，从而增强SREBP2的活化和胆固醇积累。因此，Tim‑4作为以往未鉴定的巨噬细胞胆固醇稳态调控因子，可能成为胆固醇代谢紊乱相关疾病的治疗靶点，因此具有良好的实际应用之价值。

技术领域

本发明属于分子生物学和生物医学技术领域，具体涉及Tim-4调控胆固醇合成中的应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

胆固醇是生物体内重要的脂质分子，它不仅是细胞膜的组分，还是类固醇激素、胆汁酸等物质的合成前体，对细胞的正常结构维持和功能发挥具有重要的调控作用。胆固醇稳态由从头合成、摄取、小肠吸收、逆向转运及酯化储存动态维持。

胆固醇从头合成起始于乙酰辅酶A。固醇调节原件结合蛋白2(SREBP2)作为胆固醇合成过程中的总调节因子，可启动多种胆固醇合成酶的表达。未活化的SREBP2前体形式定位于内质网，与SREBP裂解激活蛋白(SCAP)结合。当细胞内胆固醇含量较高时，内质网定位的胰岛素诱导基因(Insigs)与SCAP结合，将SCAP-SREBP2复合物滞留于内质网。相反，当细胞内胆固醇含量降低时，SCAP构象改变，与Insigs解离，同时结合COPII囊泡组分，SCAP-SREBP2复合体被转运至高尔基体。高尔基体定位的金属蛋白酶S1P和S2P依次切割SREBP2，释放出其NH2端结构域，作为活化形式的SREBP2入核启动下游靶基因的转录。

巨噬细胞中胆固醇代谢与巨噬细胞的功能发挥密切相关。巨噬细胞内胆固醇积累促进TLR信号转导和M1极化。脂质合成上调增强巨噬细胞的吞噬能力。因此，巨噬细胞中胆固醇代谢异常能够引发多种疾病。在肿瘤微环境中，胆固醇代谢重编程介导肿瘤相关巨噬细胞的招募和活化，对肿瘤进展具有重要的调控作用。在卵巢癌细胞中，胆固醇流出促进肿瘤相关巨噬细胞向M2表型极化。在B16黑色素瘤中，补充载脂蛋白A(ApoA-I)能将肿瘤相关巨噬细胞从M2转化为M1表型。动脉粥样硬化是由载脂蛋白沉积在血管内壁引发的慢性炎症反应，能够导致多种心血管疾病。在动脉粥样硬化发生的过程中，巨噬细胞通过摄取载脂蛋白并转化为泡沫细胞，泡沫细胞在血管内膜不断积聚从而形成动脉粥样硬化斑块。在阿尔兹海默症中，星形胶质细胞产生的胆固醇是控制β-淀粉样蛋白产生的必要条件。在星形胶质细胞中敲除SREBP2显著降低了β-淀粉样蛋白的产生。以上研究证实，巨噬细胞内胆固醇稳态参与调控多种疾病，靶向巨噬细胞的胆固醇稳态有望成为多种疾病的治疗靶点。

T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing molecule 4(Tim-4)属于黏蛋白家族，主要表达于抗原提呈细胞如巨噬细胞和树突状细胞的表面。Tim-4对维持巨噬细胞的功能及稳态至关重要。一方面，Tim-4可作为磷脂酰丝氨酸(PtdSer)受体促进巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬。另一方面，Tim-4能够抑制巨噬细胞促炎功能的发挥，从而抑制ConA诱导的肝炎、内毒素休克及缺血再灌注损伤。然而，发明人发现，Tim-4在巨噬细胞胆固醇调控中的应用尚未有相关研究报道。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明目的在于提供Tim-4调控胆固醇合成中的应用，本发明通过研究，首次发现Tim-4促进巨噬细胞内胆固醇合成，Tim-4缺失显著降低巨噬细胞中胆固醇含量，抑制胆固醇合成通路总调节因子SREBP2的活化及其下游酶的表达。机制上，Tim-4能够结合定位于内质网上的SREBPs伴随蛋白SCAP和转位抑制蛋白Insig1，抑制SCAP和Insig1的结合，从而促进SREBP2从内质网到高尔基体的转运，最终增强了SREBP2的活化。基于上述研究成果，从而完成本发明。