[发明专利]一种与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记及应用

说明书

本发明公开了一种与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记及应用，涉及分子生物学及遗传育种技术领域。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；在所述分子标记的287bp存在一个SNP位点，为T或C。本发明在猕猴桃中定位了与猕猴桃性别连锁的QTL，提供了一种与猕猴桃性别QTL紧密连锁的分子标记。在常规育种方法中，猕猴桃树体生长性状在苗期很难判断，并且准确度和育种效率较低，通过检测上述与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记，即可预测猕猴桃植株的性别性状，进而进行早期筛选，不仅节约生产成本而且大大提高选择效率。

技术领域

本发明涉及分子生物学及遗传育种技术领域，特别是涉及一种与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记及应用。

背景技术

分子标记技术以个体间核苷酸序列变异为基础，是生物个体遗传变异的直接反映，可以检测出生物个体之间在核苷酸序列水平上的差异，与传统的形态学标记、细胞学标记相比，它存在诸多优点：不受气候、环境等因素影响，在植物的各个组织、器官以及各发育阶段都能进行检测，多态性高。目前，该技术被广泛应用于遗传多样性分析、种质资源鉴定、遗传图谱构建、系统进化研究及分子标记辅助育种等方面。

猕猴桃具有较丰富的维生素C、蛋白质、糖等营养物质和钙、磷、铁等矿物质，深受消费者的喜爱。猕猴桃(Actinidia)为猕猴桃科(Actinidiaceae)猕猴桃属(ActinidiaLindl.)雌雄异株多年生藤本植物，是20世纪野生果树人工驯化栽培最有成就的四大果树之一。猕猴桃的雌花和雄花分别位于不同植株上的单性花植物种类，即雌株仅开雌花，雄株仅开雄花。在实际生产中雌株的经济价值大于雄株，但开花前难以从形态上进行性别区分，利用分子标记技术在童期进行性别早期鉴定可以有效提高育种效率。

发明内容

本发明的目的是提供一种与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记及应用，以解决上述现有技术存在的问题，本发明提供的分子标记与猕猴桃性别QTL紧密连锁，可用于预测猕猴桃植株的性别性状。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种与猕猴桃性别QTL连锁的分子标记，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述分子标记的287bp存在一个SNP位点，为T或C。

进一步地，所述SNP位点的基因型为TT或TC。

进一步地，所述SNP位点基因型为TT时，猕猴桃植株为雌株；所述SNP位点的基因型为TC时，猕猴桃植株为雄株。

本发明还提供一种利用上述的分子标记鉴别猕猴桃植株性别的方法，包括以下步骤：

(1)获取待鉴别猕猴桃植株的基因组DNA；

(2)利用如SEQ ID NO.2-3所示的引物对，对所述基因组DNA进行PCR扩增，得到扩增产物，之后测序获得所述扩增产物287bp的基因型，当基因型为TT时，猕猴桃植株为雌株；当基因型为TC时，猕猴桃植株为雄株。

进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应体系包括：2×HieffPlusPCRMasterMix(WithDye)25μL，正向和反向引物各2μL，基因组DNA模板3μL，ddH₂O补足至50μL。/

进一步地，在步骤(1)中，所述PCR扩增的反应程序为：98℃3min；98℃10sec，56℃20sec，72℃30sec；72℃5min。

本发明还提供一种鉴别猕猴桃植株性别的试剂盒，包含如SEQ ID NO.2-3所示的引物对。

本发明还提供上述的分子标记或试剂盒在猕猴桃育种中的应用。

进一步地，所述应用为鉴别猕猴桃植株的性别。

本发明公开了以下技术效果：