[发明专利]BAZ1B_K426hy及其多克隆抗体在制备检测肿瘤的产品中的应用

说明书

本发明提供了BAZ1B_K426羟基化(hydroxylation，hy)在制备检测肿瘤的产品中的应用，属于生物技术领域。本发明还提供了一组免疫原多肽，包括多肽A和多肽B，通过所述免疫原多肽混合免疫动物制备得到抗BAZ1B_K426hy的多克隆抗体，该多克隆抗体可以通过ELISA/Dot blot/Westernblot方法特异性识别内源性BAZ1B_K426hy蛋白，用于肿瘤和威廉姆斯综合征检测产品的制备。

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及BAZ1B_K426hy及其多克隆抗体在制备检测肿瘤的产品中的应用。

背景技术

BAZ1B基因(也被称为WSTF基因)，是在Williams综合征患者体内检测到的转录因子BAZ1B的编码基因。Williams综合征是一种遗传病，已知有20多种基因与其发病相关，研究发现在患者所表现出的一系列系统性缺陷中，BAZ1B基因扮演着较其他基因更为重要的角色。研究人员发现，与正常对照小鼠比较，BAZ1B基因敲除的小鼠体型较小，而且出生几天后即死去，提示该基因在小鼠正常生长发育中发挥着重要作用。进一步的机制研究揭示，BAZ1B蛋白功能非常多样，其参与的生物学过程包含染色质重塑、基因转录和表达调控、细胞周期和凋亡调节、DNA损伤修复和维生素代谢等。在基因转录调控方面，BAZ1B的参与方式尤为复杂，在三个重要的ATP依赖性染色质重塑复合物中均检测到了BAZ1B蛋白，兼具转录激活和抑制双重作用，这使得BAZ1B被认为处于染色质调控的核心位置。

目前，有研究表明，BAZ1B可与分泌蛋白NRG3(neuregulin-3)结合，被运输至细胞外，通过旁分泌方式促进结肠癌发生、发展。又有研究阐明了BAZ1B通过促进细胞增殖、迁移等方式，调控乳腺癌和肺癌发生、发展的作用，将BAZ1B引入肿瘤学研究领域，引起了本领域的密切关注。BAZ1B属于bromodomain adjacent to azinc-fingermotif(BAZ)蛋白家族，该家族蛋白具有多个结构域(见图1)，生物学功能多样。BAZ1B可通过PHD(planthomeodomain)、WAC(WSTF/Acf1/cbpq46)和Bromodomain结构域识别并结合组蛋白，参与调控组蛋白修饰。BAZ1B的WAC结构域具有酪氨酸激酶活性，能够磷酸化组蛋白H2A.X的第142位酪氨酸残基，参与DNA损伤后的修复或凋亡调控。含有PHD结构域的蛋白通常能够与甲基化的Lys残基(K，Lysine，赖氨酸)结合并调控基因转录，但与WSTF的PHD结构域特异性结合的组蛋白修饰位点尚未被确定。WSTF的Bromodomain结构域可与乙酰化的组蛋白结合(如H3K14Ac、H4K16Ac和H2BK12Ac)，调控下游靶基因转录。

BAZ1B促进乳腺癌细胞增殖、迁移等的功能是受到其翻译后修饰的种类和水平调控的，而且BAZ1B在多个位点可以发生多种翻译后修饰。在乳腺癌细胞中已鉴定出，在BAZ1B的Ser158(S，Serine，丝氨酸)和Lys426残基能够分别发生磷酸化(S158ph)和乙酰化(K426Ac)修饰。然而不管是Ser158残基磷酸化还是Lys426残基乙酰化，都正向调控BAZ1B活性。负向调控信号对于蛋白功能的发挥也同样具有重要的调节作用。在一定的时空特异性背景下，负向和正向调控的平衡才能使细胞和组织处于正常的稳定状态。然而目前，尚未有关于BAZ1B其他修饰位点及对应多克隆抗体/免疫原多肽的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供BAZ1B_K426hy在制备检测肿瘤的产品中的应用，通过BAZ1B_K426hy的表达量可诊断肿瘤细胞的发生。

本发明的目的在于提供一种免疫原多肽，可用于制备抗BAZ1B_K426hy的多克隆抗体。

本发明的目的还在于提供一种抗BAZ1B_K426hy的多克隆抗体，可以通过ELISA/Dot blot/Western blot方法特异性识别内源性BAZ1B_K426hy蛋白。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：