[发明专利]一株耐受高铵集胞藻ARTP-OE0528-3及其应用

说明书

本发明公开了一株耐受高铵集胞藻ARTP‑OE0528‑3及其应用，属于工业微生物领域。ARTP‑OE0528‑3，是以sll0528基因过表达的OE0528株为起始菌株，经室温等离子体诱变处理并经过高浓度氯化铵胁迫长期筛选获得。在含有200mM的NH₄Cl的胁迫下，该菌株仍能正常生长，相较于其原始菌株OE0528对于铵盐胁迫的耐受性显著提升，并且在200mM的NH₄Cl胁迫下，对于铵氮的利用能力显著高于野生型WT和起始菌株OE0528。ARTP‑OE0528‑3经多次传代均能稳定耐受高浓度氯化铵。该菌株对于进一步构建适应和降解高铵废水的基因工程菌株具有重要意义和广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于工业微生物技术领域，具体涉及一株耐受高铵集胞藻ARTP-OE0528-3及其应用。

背景技术

人类社会中氮污染的主要类型包括含铵废水，许多人类活动产生大量的含铵废水，例如石化、制药、化肥和食品工业，城市固体废物处理场所产生的渗滤液以及畜牧业养殖场产生的禽畜排泄物等废物。大量铵的排放导致水体富营养化，对水质和生态系统结构造成有害的影响。因此，有效且环境友好的高铵废水处理手段的开发极有必要。

集胞藻PCC6803作为单细胞蓝藻，属革兰氏阴性原核细菌，能进行光合自养，具有繁殖速度比较快，培养周期比较短，基因操作简单等特点，适合用作基础研究和应用开发的底盘生物。针对高铵氮废水，尽管现有的生物处理方法相对于物化处理方法，更加高效，成本更加低廉，但是目前所用到的菌容易被高浓度铵氮抑制，耐受外部胁迫的能力相对较弱。寻找更加强力有效的菌种，获得能耐受和降解更高浓度的铵氮废水的菌株，亟待进行。

发明内容

为解决相关问题，本发明的首要目的在于提供一株耐受高铵集胞藻ARTP-OE0528-3。该藻株是利用ARTP诱变经筛选获得的高铵耐受集胞藻突变株，其能耐受高浓度的铵盐胁迫，并吸收利用周围环境的铵氮，可用于高铵废水的处理。

本发明的另一目的在于提供上述耐受高铵集胞藻ARTP-OE0528-3的应用。

为了实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

Sll1499蛋白质突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

上述Sll1499蛋白质突变体相关的生物材料，为如下生物材料中的一种或多种：

(1)编码所述的Sll1499蛋白质突变体的基因；

(2)含有(1)中所述基因的载体；

(3)含有(1)中所述基因或(2)中所述载体的宿主细胞。

进一步地，(1)中所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

进一步地，(3)中所述宿主细胞为集胞藻细胞。

上述Sll1499蛋白质突变体或生物材料在提升集胞藻高铵耐受性中的应用。

一株耐受高铵集胞藻，命名为集胞藻(Synechocystis sp.)ARTP-OE0528-3，其于2022年10月19日保藏于位于湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC M 20221605。

上述耐受高铵集胞藻的应用，应用于构建耐受高浓度铵盐的微藻工程菌。

上述耐受高铵集胞藻的应用，应用于去除环境中的铵氮。

在所述的应用中，所述的环境包括培养基、水体和土壤。

在所述的应用中，所述的环境中的铵氮浓度可为220±20mM。

在所述的应用中，所述的耐受高铵集胞藻的起始接种浓度按OD₇₃₀为0.1±0.02计。