[发明专利]目标物触发球形核酸自组装快速激活CRISPR-Cas12a信号开关的传感器

权利要求书

1.目标物触发球形核酸自组装快速激活CRISPR-Cas12a信号开关的传感器，其特征是：所述传感器包括发光材料和传感器，所述发光材料为具有强且稳定ECL信号的材料AuAgNCs@MOF-5，且所述材料AuAgNCs@MOF-5表面有修饰多巴胺的猝灭探针；

所述传感器包括球形核酸A和球形核酸B，所述球形核酸A和球形核酸B均由发夹和Y形DNA纳米结构构成，其中发夹不仅包含依赖Zn²⁺的DNAzyme的识别位点，而且包含CRISPR/Cas12a的激活子，Y形DNA纳米结构由辅助链(APs)、DNAzyme srands和AMACR适配体构成，球形核酸A和球形核酸B的辅助链分别为AP_A和AP_B，AP_A和AP_B互补配对。

2.如权利要求1所述的目标物触发球形核酸自组装快速激活CRISPR-Cas12a信号开关的传感器，其特征是：所述传感器的构建方法包括以下步骤：

步骤一、合成具有强且稳定ECL信号的材料AuAgNCs@MOF-5，在材料表面连接修饰有多巴胺的猝灭探针使背景信号降低；

步骤二、传感器的构建：

构建两种不同的球形核酸A和球形核酸B，球形核酸A和球形核酸B均由发夹和Y形DNA纳米结构构成；其中，发夹不仅包含依赖Zn²⁺的DNAzyme的识别位点,而且包含CRISPR/Cas12a的激活子；Y形DNA纳米结构由辅助链(APs)、DNAzyme strands、AMACR适配体构成；球形核酸A和球形核酸B的辅助链分别为AP_A和与之互补配对的AP_B；

在与目标物AMACR孵育时，AMACR与AMACR适配体结合，Y形DNA纳米结构解体，导致DNAzyme strands游离，AP_A和AP_B互补配对并将球形核酸连接成网络状结构；

游离的DNAzyme srands与发夹互补配对，形成依赖锌离子的DNA酶；当锌离子存在时，DNA酶识别特异性位点对发夹进行剪切，使CRISPR/Cas12a的激活子被剪切下来；

通过磁性分离收集含有激活子的上清液；

CRISPR/Cas12a的激活子激活CRISPR/Cas12a蛋白，发挥反式切割能力，对材料AuAgNCs@MOF-5表面的猝灭探针进行切割，使信号恢复；通过构建传感器，对血清中少量的AMACR进行转化和扩增，最终实现对目标物准确、灵敏的检测。

3.如权利要求1或2所述的目标物触发球形核酸自组装快速激活CRISPR-Cas12a信号开关的传感器应用于在血清中对前列腺癌标志物AMACR的检测。