[发明专利]一种大孔树脂纯化红花红色素的工艺

权利要求书

1.一种大孔树脂纯化红花红色素的方法，包括如下步骤：

(1)用纯水将红色素粗品溶解成红色素溶液；

(2)将大孔树脂用95％乙醇浸泡充分溶胀后，用乙醇淋洗通柱至洗出液不浑浊，改用大量水洗直至无醇味，抽滤备用；所述大孔树脂为HPD400型大孔树脂或X-5大孔树脂；

(3)称取经预处理后的湿树脂，置于具塞锥形瓶中，分别加入红花红色素溶液，室温振荡，离心取上清液，定容后进HPLC，根据峰面积计算浓度，计算静态吸附率；然后加入乙醇溶液对树脂进行解吸，室温振荡，离心取上清液，定容，根据峰面积计算浓度，计算静态解吸率；

(4)称取经预处理活化的树脂，湿法装柱，加入红花红色素溶液，用乙醇洗脱，收集洗脱液旋转蒸发后转移至量瓶，乙醇定容，进HPLC仪测定，根据色谱峰面积计算回收率Q，Q＝S/S₀，S为大孔树脂处理后红花红色素的峰面积，S₀为未处理前红花红色素溶液的峰面积。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述大孔树脂为HPD400型大孔树脂。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中上样液pH为6-7。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中：上样液质量浓度为0.05-0.125g·mL^-1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中：洗脱乙醇体积分数为58％-70％。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(4)中：洗脱乙醇体积分数58％，上样液质量浓度0.125g·mL^-1，上样液pH 6.0。

7.根据权利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：步骤(4)中：洗脱液用量为4BV；洗脱体积流量为0.5～1.5mL·min^-1；上样量与树脂比为0.3～0.4；上样体积流量为0.5～1.0mL·min^-1。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：具体包括如下步骤：

(1)用纯水将红色素粗品溶解成按原药材计浓度为0.10g·mL^-1的红色素溶液；

(2)将HPD400型大孔树脂用95％乙醇浸泡24h充分溶胀后，用乙醇淋洗通柱至洗出液不浑浊，改用大量水洗直至无醇味，抽滤备用；

(3)称取经预处理后的湿树脂2g，置于具塞锥形瓶中，分别加入25mL 0.10g·mL-1的红花红色素溶液，室温振荡2h，离心取上清液，定容至25mL后进HPLC，根据峰面积计算浓度，计算静态吸附率；然后加入25mL 60％乙醇溶液对树脂进行解吸，室温振荡2h，离心取上清液，定容至25mL，根据峰面积计算浓度，计算静态解吸率；

(4)称取经预处理活化的树脂3g，湿法装柱，加入10mL 0.10g·mL^-1的红花红色素溶液，上样液质量浓度0.125g·mL^-1，上样液pH 6.0，控制上样体积流量为0.5mL·min^-1，用4BV的乙醇以1.0mL·min^-1的体积流量洗脱，洗脱乙醇体积分数58％，收集洗脱液旋转蒸发后转移至10mL量瓶，60％乙醇定容，进HPLC仪测定，根据色谱峰面积计算回收率Q，Q＝S/S₀，S为大孔树脂处理后红花红色素的峰面积，S₀为未处理前红花红色素溶液的峰面积。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述红花红色素粗品的制备为：红花经过水洗去除大部分黄色素后于25℃干燥，打粉；精密称取10g红花粉末于具塞锥形瓶中，按液料比23:1加入58％丙酮溶液，调节温度40℃，超声41min后过滤，将滤液置于分液漏斗中，加入适量硫酸铵振荡摇匀，静置使其分层，上相为有机相，下相为水相，收集上相将丙酮回收干，冷冻干燥得红色素粗品。

10.权利要求1所述方法的优化方法，其特征在于：部分因子设计筛选影响红花红色素回收率的主要因素，响应面实验，遗传神经网络模型拟合与预测主要影响因素的最优数值。