[发明专利]一种蛇床的组织培养方法

权利要求书

1.一种蛇床的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)选取外植体：选取蛇床苗的节间部位作为外植体，备用；

(2)培养愈伤组织：将所述外植体置于愈伤组织培养基中进行诱导培养，得到愈伤组织；

(3)诱导丛生芽/苗：将所述愈伤组织置于生苗诱导培养基中进行诱导培养，诱导分化得到丛生芽/苗；

(4)诱导生根：将所述丛生芽/苗置于生根诱导培养基中进行诱导生根培养，得到形成根系的组培苗；

(5)练苗移栽：将得到的所述组培苗进行光照练苗，并进行移栽培养。

2.根据权利要求1所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(2)包括将所述外植体置于初代愈伤组织培养基进行初代培养以诱导形成第一代愈伤组织的步骤，以及，将所述第一代愈伤组织置于继代愈伤组织培养基进行继代培养以诱导形成第二代愈伤组织的步骤。

3.根据权利要求2所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述初代愈伤组织培养基包括MS培养基，并添加0.5-1mg/L 6-BA、1-2mg/L 2,4-D和0.5-1mg/L NAA。

4.根据权利要求2或3所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述继代愈伤组织培养基包括MS培养基，并添加0-1mg/L 6-BA和0.5-1mg/L NAA。

5.根据权利要求1-4任一项所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述生苗诱导培养基包括MS培养基，并添加0.5-2mg/L6-BA、0.5-2mg/L NAA和1-4mg/L IBA。

6.根据权利要求1-5任一项所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(4)中，所述生根诱导培养基包括：

MS培养基，并添加0.1mg/L 6-BA、0.2-2mg/L IBA、0.2-0.4mg/L NAA；或者，

1/2MS培养基，并添加0.1mg/L 6-BA、0.2-0.4mg/L IBA、0.2-0.4mg/L NAA；或者，

B5培养基，并添加0.2mg/L IBA、0.2mg/L NAA。

7.根据权利要求1-6任一项所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(5)中，所述练苗步骤包括：当组培苗的新根系长至2-4cm，并且长出侧根，苗高于3cm时，将组培苗不开口移到自然光照下进行练苗2-3d，随后在湿度50-60％下进行开口练苗1-2d。

8.根据权利要求1-7任一项所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(5)中，所述移栽步骤包括：取发根的小苗进行培养基清洗的步骤，以及，栽种至移栽基质进行培养的步骤；

所述移栽基质包括田园土和营养土的混合物；

所述移栽步骤的培养温度为27±1℃。

9.根据权利要求1-8任一项所述蛇床的组织培养方法，其特征在于，所述步骤(1)中还包括培育无菌蛇床苗的步骤，具体包括：取胡萝卜和蛇床种子进行浸种、消毒及预处理，并置于无激素的MS固体培养基中，于黑暗、温度24-26℃、pH5.8-5.9的环境下进行培养，诱导所需无菌蛇床苗。

10.由权利要求1-9任一项所述方法培养获得的蛇床。