[发明专利]一种猪圆环病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种猪圆环病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗及其制备方法，属于疫苗领域。该三联灭活疫苗包含猪圆环病毒2型抗原、猪肺炎支原体抗原、副猪嗜血杆菌4型抗原、副猪嗜血杆菌5型抗原，其中，猪圆环病毒2型抗原的浓度为30‑50ug/ml，猪肺炎支原体抗原的浓度为110‑130ug/ml，副猪嗜血杆菌4型抗原的浓度为(4‑6)×10⁸cfu/ml，副猪嗜血杆菌5型抗原的浓度为(4‑6)×10⁸cfu/ml。本发明所提供的三联灭活疫苗可做到一针四防，减少免疫次数及应激，切实解决了养猪业的难题。

技术领域

本发明属于疫苗领域，具体涉及一种猪圆环病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

猪圆环病毒2型(简称PCV2)是断奶仔猪多系统衰竭(PMWS)的主要病原。PMWS最早发于加拿大，并很快在欧美及亚洲一些国家(包括中国)发生和流行。除PMWS外，猪皮炎肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、增生性坏死性肺炎(PNP)、猪繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦与PCV2感染有重要关联，给养猪业造成严重的经济损失。感染PCV2的猪处于严重免疫抑制状态是PMWS发生的重要原因，其致病性主要表现为免疫系统损伤，淋巴细胞减少，淋巴结肿大等病变。

猪气喘病，又称猪支原体肺炎或猪地方性流行性肺炎，是由猪肺炎支原体(简称MHP)引起的一种接触性慢性呼吸道传染病，普遍存在于世界各地。患病猪主要表现为咳嗽和气喘，生长迟缓，饲料转化率低，体温基本正常。猪肺炎支原体常与其他病原混合感染，使其感染的严重性加强，是造成养猪业经济损失最重要的疾病之一。

副猪嗜血杆菌(简称HPS)是猪上呼吸道的一种共栖菌。在转群、断奶后失去母源抗体保护、其他疾病导致免疫力下降时，HPS感染表现出浆膜炎、脑膜炎等症状，主要在断奶后和保育期发病。

PMWS和猪支原体肺炎均属于免疫抑制病，会导致猪群免疫力下降，给HPS的致病创造条件，PCV2、MHP、HPS这三种抗原常混合感染，造成猪只的发病及死亡，严重影响我国养猪事业的发展。但是，目前市售疫苗中仅有相关单苗或者二联疫苗，存在免疫频率过大，导致猪只应激的问题。另外，由于前期抗生素滥用，导致耐药菌株的出现，使药物治疗趋于无效。因此，开发猪圆环病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗具有重要意义。

申请号为CN201210221969.2的专利申请公开了一种疫苗组合物，包含灭活的猪圆环病毒2型抗原、灭活的副猪嗜血杆菌(灭活的副猪嗜血杆菌血清4型和血清5型)、灭活的猪肺炎支原体以及疫苗佐剂，所述的疫苗佐剂为氢氧化铝胶、矿物油、卡波姆(Carbomer)、Gel01(法国SCIPPIC)、蜂胶、ISA206(法国SCIPPIC)、ISA760VG(法国SCIPPIC)的一种或任意几种的组合。该疫苗组合物打一针即可预防猪圆环病毒病、猪支原体肺炎和副猪嗜血杆菌病三种病的目的。但是，该疫苗组合物中的猪肺炎支原体抗原的免疫原性较低，免疫保护能力有待进一步提高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猪圆环病毒、猪肺炎支原体、副猪嗜血杆菌三联灭活疫苗及其制备方法。

本发明提供了一种三联灭活疫苗，它包含猪圆环病毒2型抗原、猪肺炎支原体抗原、副猪嗜血杆菌4型抗原、副猪嗜血杆菌5型抗原，其中，猪圆环病毒2型抗原的浓度为30-50ug/ml，猪肺炎支原体抗原的浓度为110-130ug/ml，副猪嗜血杆菌4型抗原的浓度为(4-6)×10⁸cfu/ml，副猪嗜血杆菌5型抗原的浓度为(4-6)×10⁸cfu/ml。

进一步地，所述猪圆环病毒2型抗原的浓度为40ug/ml，猪肺炎支原体抗原的浓度为120ug/ml，副猪嗜血杆菌4型抗原的浓度为5×10⁸cfu/ml，副猪嗜血杆菌5型抗原的浓度为5×10⁸cfu/ml。

进一步地，所述猪圆环病毒2型抗原为PCV2 Cap蛋白。