[发明专利]一种马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法

权利要求书

1.一种马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法，其特征在于，所述方法包括对马铃薯茎叶喷洒酵母菌株发酵液的混合物的步骤，其中，酵母菌株为包括突变的鼠李糖苷酶的酵母菌株，包括突变的半乳糖苷酶的酵母菌株，以及包括突变的葡萄糖苷酶的酵母菌株，其中，

所述突变的鼠李糖苷酶由序列号为 WP_045271760.1的氨基酸序列通过以下突变而得：第20位氨基酸由G突变为D，第82位氨基酸由T突变为I，第89位氨基酸由E突变为D，第105位氨基酸由L突变为P，第115位氨基酸由S突变为W，第162位氨基酸由A突变为S，第210位氨基酸由E突变为D，第221位氨基酸由V突变为A，第252位氨基酸由V突变为D，第348位氨基酸由T突变为M，第352位氨基酸由Q突变为K，第358位氨基酸由G突变为V，第416位氨基酸由S突变为R，第517位氨基酸由F突变为S，第586位氨基酸由T突变为I，第612位氨基酸由P突变为L，第750位氨基酸由I突变为V，以及第815位氨基酸由D突变为E；

所述突变的半乳糖苷酶由序列号为WP_045271763.1的氨基酸序列通过以下突变而得：第20位氨基酸由A突变为G，第91位氨基酸由M突变为K，第102位氨基酸由R突变为C，第147位氨基酸由V突变为E，第150位氨基酸由W突变为G，第188位氨基酸由T突变为S，第282位氨基酸由D突变为V，第362位氨基酸由S突变为A，第386位氨基酸由V突变为F，第443位氨基酸由A突变为D，第664位氨基酸由D突变为N，第739位氨基酸由L突变为M，以及第828位氨基酸由P突变为T；

所述突变的葡萄糖苷酶由序列号为WP_045271763.1的氨基酸序列通过以下突变而得：第50位氨基酸由D突变为A，第87位氨基酸由K突变为N，第146位氨基酸由A突变为T，第179位氨基酸由V突变为F，第185位氨基酸由A突变为E，第247位氨基酸由G突变为R，第260位氨基酸由P突变为A，第290位氨基酸由R突变为H，第295位氨基酸由H突变为L，第316位氨基酸由E突变为K，第332位氨基酸由T突变为N，第374位氨基酸由A突变为V，第378位氨基酸由R突变为Q，第383位氨基酸由A突变为T，第495位氨基酸由A突变为V，第512位氨基酸由I突变为T，以及第543位氨基酸由L突变为P。

2.根据权利要求1所述的马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法，其特征在于，所述包括突变的鼠李糖苷酶的酵母菌株、包括突变的半乳糖苷酶的酵母菌株、包括突变的葡萄糖苷酶的酵母菌株的发酵液以1:1:1混合。

3.根据权利要求1所述的马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法，其特征在于，将包含编码所述突变的鼠李糖苷酶的基因的重组表达载体导入酵母细胞中，获得所述包括突变的鼠李糖苷酶的酵母菌株。

4.根据权利要求1所述的马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法，其特征在于，将包含编码所述突变的半乳糖苷酶的基因的重组表达载体导入酵母细胞中，获得所述包括突变的半乳糖苷酶的酵母菌株。

5.根据权利要求1所述的马铃薯茎叶中龙葵素的生物酶降解方法，其特征在于，将包含编码所述突变的葡萄糖苷酶的基因的重组表达载体导入酵母细胞中，获得所述包括突变的葡萄糖苷酶的酵母菌株。