[发明专利]一种基于指示植物检测甘薯感染病毒的方法

说明书

本发明提供了一种基于指示植物检测甘薯感染病毒的方法，属于农业检测技术领域。所述的检测方法为：试管内靠接培养不受季节性限制、检测成本低、灵敏度较高、检测结果不易受环境影响。在操作上更为简化，可通过肉眼直接进行观察指示植物巴西牵牛是否出现相关感病症状。本发明简化了甘薯病毒检测技术流程，为甘薯脱毒种苗制备过程的早期提供新的更为简便、有效的检测方法。

技术领域

本发明属于农业检测技术领域，具体涉及一种基于指示植物检测甘薯感染病毒的方法。

背景技术

甘薯是我国重要的谷物和粮食作品之一，目前我国甘薯产量及种植基地面积排名全球第一，种植基地面积已经达到全球各地甘薯种植基地的一半以上，总产量占比高达80％左右。然而，近年来甘薯出现了显著的品种退化现象。其中，甘薯病毒病是导致这一现象的最主要原因。据报道，世界上存在的甘薯病毒达38种，分属5个科，我国至少存在15种甘薯病毒，感染率高达60％～70％，有的甚至高达90％，可导致减产50％以上；此外，病毒与病毒之间，还存在共同侵染作用可引起产量损失高达80％～90％，甚至绝产绝收，严重影响农作物的产量和品质，目前仍然无治疗效果理想的药剂。因此，研制和生产甘薯脱毒种苗及其早期检测和诊断技术是决定甘薯产业能否持续健康发展的前提。

由于甘薯同属植物巴西牵牛对甘薯的多种病毒十分敏感，用来作为甘薯脱毒种苗试验和生产中进行病毒检测的指示植物。张希太等研究了试管内指示植物嫁接、试管内甘薯研磨液浸提物浸染、室外传统的巴西牵牛种子苗作为指示植物嫁接检测等方法(张希太等，指示植物检测甘薯病毒技术的改进研究.西南农业学报，2014，27(4))实现早期检测，但该方法在病毒检测过程中操作难度较大，有待辅以新的检测方法简化技术流程，为甘薯脱毒种苗制备过程提供更为简便且有效的检测方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种基于指示植物检测甘薯感染病毒的方法，以巴西牵牛作为指示植物通过靠接方式，使感染甘薯的病毒转移至巴西牵牛后外观表现感毒症状，不仅实现了甘薯组培苗的早期检测，而且还具有操作简便，结果准确可靠的特点。

本发明提供了一种基于指示植物检测甘薯感染病毒的方法，包括以下步骤：

将巴西牵牛通过靠接方式接种至甘薯外植体上，得到嫁接材料；

将所述嫁接材料在培养基中培养，培养期间观察巴西牵牛的新叶表型是否出现病毒感染症状，巴西牵牛表型若出现病毒感染症状，说明甘薯外植体感染病毒，否则说明甘薯外植体未感染病毒。

优选的，所述甘薯外植体为甘薯双芽茎段；所述甘薯双芽茎段的茎粗为2～3mm；

所述巴西牵牛的接穗为巴西牵牛双芽茎段。

优选的，所述靠接方式接种的方法为分别在甘薯双芽茎段和巴西牵牛双芽茎段的一端切割形成创面；将甘薯双芽茎段的创面和巴西牵牛双芽茎段的创面紧密贴合固定得到嫁接材料。

优选的，所述形成创面的方法为分别在甘薯双芽茎段和巴西牵牛双芽茎段的一端削去1/4～1/3长度、1/3～1/2主茎表皮和组织。

优选的，所述培养基为MS培养基。

优选的，所述培养的温度为28～30℃；

所述培养进行光照；光照强度1800～2000lx、光照周期为8h/d；所述光照的时间为上午8：00～12:00；下午14:00～16:00。

优选的，所述培养的时间为10～20d。

优选的，感染病毒的巴西牵牛的新叶表型包括以下一种或几种特征：巴西牵牛均出现叶边缘干枯、黄叶、花叶症状。