[发明专利]二硫苏糖醇在制备基于电化学发光免疫分析的产品中的应用

说明书

本发明涉及一种二硫苏糖醇在制备基于电化学发光免疫分析的产品中的应用。经本申请的发明人研究发现，通过添加一定量的二硫苏糖醇(DTT)可以显著性提升三联吡啶钌标记抗体的稳定性。因此，本发明提供了一种二硫苏糖醇在制备基于电化学发光免疫分析的产品中的应用，产品包括含有三联吡啶钌标记抗体和二硫苏糖醇的检测试剂。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种二硫苏糖醇在制备基于电化学发光免疫分析的产品中的应用。

背景技术

电化学发光(又称电致化学发光)是指通过在电极表面施加适合的电压产生一些特定的电生物质，然后这些电生物质之间或电生物质与体系中的一些组分之间通过某些特定的反应引起电子传递然后形成激发态，这些激发态物质由激发态返回到基态同时释放能量并伴随有发光的一种现象。电化学发光需要经历两个过程：电化学反应与化学发光反应。电化学反应过程的任务主要是提供发生化学发光反应的中间体，化学发光反应则是产生的一些中间体之间或是中间体与体系中其它某些组分之间发生化学发光反应而产生激发态的过程，当激发态的物质回到基态时伴有光辐射现象。

电化学发光分为四种类型：第一种：电化学发光通过单重激发态途径的产生，在电极上施加适当的电压，分子R在电压作用下被氧化或被还原产生R⁺或R^-，然后R⁺和R^-相互反应产生单重激发态，此单重激发态回到基态时释放能量并伴随发光。第二种：电化学发光是通过三重激发态途径的产生，在电极上施加适当的电压，使分子R在电压作用下被氧化或被还原产生R⁺或R^-，然后R⁺和R^-再相互反应产生三重激发态，该三重激发态回到基态时伴有光辐射现象。第三种：电化学发光是共存物质的二次反应引起的，溶液内存在的其他物质与电解的产物之间发生氧化或是还原反应，生成分子或离子型激发态。第四种：由有某些特殊性质的溶剂分子引起的化学发光，如在六甲基磷酸肽胺中若存在较高浓度的NaClO₄、LiClO₄、LiCl、NaBF₄、KI等类无机化合物，当外加一定直流电压时，就会产生电化学发光。

电化学发光免疫分析((electro-chemiluminescence immunoassay，ECLIA)是将免疫技术和电化学发光相结合的一种标记免疫分析方法。它结合了抗原抗体反应的特异性高和电化学发光检测的灵敏度高的特点，因其具有无放射性，灵敏度高，线性范围宽，操作简便，易标记，可实现在线活体分析等优点而备受关注。电化学发光免疫分析适用于对生物组织、体液等复杂生物样品中极低含量的生化物质及药物的分析，因此在免疫分析研究中发挥着越来越重要的作用。

目前，电化学发光免疫分析的化学发光剂主要为三联吡啶钌[Ru(bpy)₃]²⁺，用化学发光剂三联吡啶钌标记抗体，通过抗原抗体反应和磁颗粒分离技术，再根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度的大小而对待测的抗原或抗体进行定量或定性。著名的罗氏诊断公司的免疫检测产品就为此方法学的产品。三联吡啶钌显著特点就是它的稳定性要远远高于同样用途的各种酶类(例如HRP酶、AP酶等)。一般认为采用三联吡啶钌标记抗体后抗体的活性不受影响，但研究多个三联吡啶钌标记的抗体后发现，有大约二十分之一的抗体在被标记上三联吡啶钌后，稳定性急剧下降，在溶液中的半衰期从数年降到了一周左右，而其他抗体标记三联吡啶钌后稳定性无明显变化。因此，如何能够使这些三联吡啶钌标记的抗体稳定，减少三联吡啶钌对被标记的抗体的影响，成为了制备高质量电化学发光免疫试剂的关键环节。

发明内容

经本申请的发明人研究发现，通过添加一定量的二硫苏糖醇(DTT)可以显著性提升三联吡啶钌标记抗体的稳定性。基于此，本申请一实施例提供一种二硫苏糖醇在制备基于电化学发光免疫分析的产品中的应用。

此外，还提供了一种稳定性好的基于电化学发光免疫分析的产品。