[发明专利]交联重组胶原蛋白海绵及其制备方法和应用

权利要求书

1.交联重组胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将重组胶原蛋白和白杨素粉末溶于碱性溶液中，得到pH值为10～13的预混液，其中重组胶原蛋白质量为碱性溶液质量的7wt％～15wt％，白杨素粉末质量为碱性溶液质量的0.1wt％～5wt％；

(2)将交联剂加入预混液中，混合均匀后得到混合溶液；

(3)将混合溶液在55～85℃下水浴加热，进行交联反应，得到交联重组胶原蛋白水凝胶；

(4)将交联重组胶原蛋白水凝胶置于水中溶胀；

(5)将溶胀的交联重组胶原蛋白水凝胶置于真空冷冻干燥机中进行预冻和冷冻干燥，得到交联重组胶原蛋白海绵半成品；

(6)将第一次冷冻干燥的交联重组胶原蛋白海绵置于水中进行搅拌清洗，再将其置于真空冷冻干燥机中进行预冻和冷冻干燥，得到交联重组胶原蛋白海绵。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，重组胶原蛋白由保藏编号为CGMCC No.5021的巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris发酵所产生；碱性溶液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，氢氧化钠溶液的浓度为0.04mmol/L～100mmol/L，更优选为0.04mmol/L～12.5mmol/L；重组胶原蛋白质量为碱性溶液质量的9wt％～12wt％；白杨素粉末质量为碱性溶液质量的0.5wt％～4wt％。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，预混液的pH值为10～12。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，交联剂选自1,4-丁二醇二环氧甘油醚、3-氯-1,2-环氧丙烷、1,3-二环氧丁烷、碳化二亚胺或1,2,7,8-二环氧辛烷。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，1,4-丁二醇二环氧甘油醚质量为预混液质量的0.8wt％～4wt％，更优选为1wt％～2wt％。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，水浴加热温度为60～70℃，交联反应时间为2～24h，更优选为8～16h。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，水为纯化水或注射用水，溶胀时间为0.2～24h，更优选为0.5～8h；步骤(6)中，水为纯化水或注射用水，清洗时间为4～48h，更优选为8～24h。

9.根据权利要求1至8任一所述的制备方法制得的交联重组胶原蛋白海绵。

10.根据权利要求9所述的交联重组胶原蛋白海绵在制备创面修复材料中的应用。