[发明专利]一株肺炎克雷伯菌KP22及其应用

说明书

本申请涉及生物医药技术领域，具体公开了一株肺炎克雷伯菌KP22及其应用；所述肺炎克雷伯菌株Klebsiella pneumoniae KP22的微生物保藏号为CDMCC No：1.3666，保藏日期：2022年09月06日，保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心；本申请的肺炎克雷伯菌株KP22经鉴定为对喹诺酮类、呋喃妥因、四环素类、青霉素类、头孢类等临床常用抗菌药物均耐受的多重耐药菌株；外排泵抑制剂与喹诺酮类联合用药实验、全基因组测序及实时荧光定量PCR等实验表明：本申请菌株耐药机制为新型外排泵OqxB介导的多重耐药菌株，其对研究肺炎克雷伯菌多重耐药机制及开发相应的治疗策略有重要价值。

技术领域

本申请涉及生物医药技术领域，更具体地说，它涉及一株肺炎克雷伯菌KP22及其应用。

背景技术

肺炎克雷伯菌是肠杆菌科克雷伯菌属中最主要的一种病原菌，广泛存在于自然环境中，同时也可定植于人的肠道、口腔以及皮肤等部位。肺炎克雷伯菌是临床上非常重要的机会致病菌之一，能够引起肺炎、尿路感染、手术部位感染以及血流感染等一系列的感染，常常发生在免疫力低下人群以及长期住院的患者。

肺炎克雷伯菌易对抗菌药物产生耐药性，随着抗菌药物的广泛使用，肺炎克雷伯菌呈现出多重耐药（multiple drug resistance，MDR）趋势，意味着临床可用于治疗肺炎克雷伯菌感染的抗生素越来越少，严重威胁着公共卫生安全及人类健康。因此，对多重耐药肺炎克雷伯菌耐药机制及其应对策略的研究至关重要。

耐药外排泵是指细菌将胞内的药物或毒性物质排出胞外的蛋白转运系统，在外排过程中需要进行质子交换或水解ATP提供能量。细菌通过耐药泵将药物排出胞外是细菌的主要耐药机制之一，尤其是多重耐药泵，可以外排结构迥异的多种药物或对细菌有毒的代谢产物。多重耐药泵介导的包括肺炎克雷伯在内的病原菌多重耐药，对病原菌的药物敏感性以及细菌感染的临床治疗造成严重威胁。

发明内容

为了研究多重耐药肺炎克雷伯菌的感染，本申请提供了一株肺炎克雷伯菌KP22及其应用。

第一方面，本申请提供了一株肺炎克雷伯菌KP22，采用如下的技术方案：

一株肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniae KP22的微生物保藏号为CDMCC No：1.3666，保藏日期：2022年09月06日，保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心。

优选的，所述肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniae KP22来源于临床分离；在营养琼脂培养基中培养，得到大小中等、边缘光滑湿润、圆形的菌落；接种至营养肉汤中，利用革兰氏染色观察，得到革兰氏阴性、较短粗的杆菌。

优选的，所述肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniae KP22的PCR扩增细菌16SrDNA的通用引物为：

正向引物f：5’-ccagcttccagatagccg-3’；

反向引物r：5’-gctacttcccgacagccc-3’。

优选的，所述肺炎克雷伯菌株 Klebsiella pneumoniae KP22的菌株耐药机制为新型外排泵OqxB介导的多重耐药菌株。

通过采用上述技术方案，本申请公开的一株临床来源的肺炎克雷伯菌KP22，经质谱、全基因组测序鉴定确认与肺炎克雷伯菌标准菌株信息一致；经耐药基因检测和药敏实验确认是一株特异性过表达的新型多重耐药外排泵OqxB的菌株，对于研究该类耐药菌株在临床传播、演变并制定精准给药策略以及研究新型多重耐药外排泵OqxB抑制剂等研究均有重要价值。