[发明专利]用于诊断肺癌的标志物、核酸产品及试剂盒

说明书

本申请涉及一种用于诊断肺癌的标志物、核酸产品及试剂盒，标志物包括SCARA5、ZNF323和DLX1中的一种或多种，通过检测上述标志物的甲基化水平诊断肺癌。本申请通过研究发现SCARA5、ZNF323和DLX1能够作为生物标志物，对早期肺癌进行高灵敏度、高特异性的筛查诊断。

技术领域

本申请涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种用于筛查肺癌的组合物、试剂盒、应用及其方法。

背景技术

肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。2020年肺癌占所有新发肿瘤病例的11.4％，占所有肿瘤死亡病例的18％。肺癌存在发病率高、死亡率高、五年生存率低的特点。因此在肺癌早期进行筛查和诊断已成为延长患者生存期、挽救患者生命的关键。

早期肺癌筛查的方法主要依靠影像学(例如胸部X线和胸部CT)，胸部X线虽然具有穿透力高、使用方便、辐射剂量小的特点，但分辨率低，很难发现直径＜5mm～6mm的病变，且存在死角，因此，临床不建议胸部X线用于肺癌的筛查。胸部低剂量CT(LDCT)筛查目前是国际公认的检测肺结节和早期肺癌诊断最有效的方法，然而，由于其高灵敏度，也容易检测到许多非肿瘤性肺结节，所以假阳性结节的大量检出是LDCT筛查亟需解决的重要问题。

发明内容

本申请研究发现，SCARA5、ZNF323、DLX1基因的甲基化与肺癌极具相关性。基于此，本申请提供一种高灵敏度、高特异性的用于诊断肺癌的标志物、核酸产品及试剂盒。

根据本申请的一个方面，提供了一种用于诊断肺癌的标志物，其特征在于，所述标志物包括SCARA5、ZNF323和DLX1中的一种或多种，通过检测所述标志物的甲基化水平诊断肺癌。

在其中一个实施例中，以GRCh38.p14为参考，通过检测以下区域中的一个或多个的甲基化水平诊断肺癌：

区域1：Chr8:27990673～27994673；

区域2：Chr6:28354271～28358271；

区域3：Chr2:172085507～172089674。

根据本申请的另一方面，提供了检测上述标志物的甲基化水平的试剂在制备诊断肺癌的产品中的应用。

根据本申请的另一方面，提供了一种用于诊断肺癌的核酸产品，所述核酸产品包括用于检测上述标志物的甲基化水平的引物对。

在其中一个实施例中，所述核酸产品还包括与所述引物对对应的检测探针。

在其中一个实施例中，所述引物对包括以下的一组或多组：

核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的用于检测SCARA5基因甲基化水平的第一引物对；

核苷酸序列如SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示的用于检测ZNF323基因甲基化水平的第二引物对；及

核苷酸序列如SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的用于检测DLX1基因甲基化水平的第三引物对。

在其中一个实施例中，与所述第一引物对对应的检测探针的核苷酸序列如SEQ IDNo.3所示；和/或，

与所述第二引物对对应的检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；和/或

与所述第三引物对对应的检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示。

在其中一个实施例中，还包括内参引物对和与所述内参引物对对应的内参探针。

在其中一个实施例中，所述内参引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.10和SEQ IDNo.11所示，所述内参探针的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示。