[发明专利]布劳特氏菌的发酵培养基及发酵工艺

权利要求书

1.一种用于培养布劳特氏菌(Blautia sp.)、特别是延长布劳特氏菌(Blautiaproducta)的培养基，其包括碳源、非动物源氮源、生长因子、益生元。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其中，

所述碳源选自：无机碳源如CO₂/H₂、CO、CO₃^2-、HCO₃^-，有机碳源如葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、海藻糖，及其任意组合，优选为蔗糖，更优选为蔗糖与无机碳源的组合；优选地，所述碳源的浓度范围为2-200g/L，优选为2-20g/L；

所述非动物源性氮源选自酵母浸粉、酵母蛋白胨、大豆蛋白胨、小麦蛋白胨、及其任意组合，优选为酵母浸粉或酵母蛋白胨；优选地，所述非动物源性氮源的浓度范围为5-200g/L，优选为5-50g/L；

所述生长因子选自半胱氨酸、半胱氨酸盐酸盐及其水合物、氯化血红素、生物素、叶酸、钴胺素、对氨基苯甲酸、及其任意组合，优选为半胱氨酸盐酸盐；优选地，所述生长因子的浓度范围为0.5-5g/L，优选为0.5-2g/L；

所述益生元选自低聚果糖、低聚木糖、大豆低聚糖、菊粉、低聚异麦芽糖、低聚甘露糖、乳糖醇、异麦芽酮糖、及其任意组合，优选为大豆低聚糖；优选地，所述益生元的浓度范围为1-50g/L，优选为1-5g/L。

3.根据权利要求1或2所述的发酵培养基，其中，所述发酵培养基还包括缓冲盐；

优选地，所述缓冲盐选自磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、碳酸氢钠或其任意组合；

更优选地，磷酸二氢钾和磷酸氢二钾的浓度范围各自为0-4.5g/L，优选为0-1g/L；

更优选地，碳酸氢钠的浓度范围为1-10g/L，优选1-4g/L。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的发酵培养基，其中，所述发酵培养基包括11.42g/L蔗糖、21.12g/L酵母浸粉、1.76g/L大豆低聚糖、1.18g/L半胱氨酸盐酸盐，以及任选的0.45g/L磷酸氢二钾、0.45g/L磷酸二氢钾和4g/L碳酸氢钠，余量为水；或者，所述发酵培养基包括21.12g/L酵母浸粉、1.76g/L大豆低聚糖、1.18g/L半胱氨酸盐酸盐、4g/L碳酸氢钠，以及任选的0.45g/L磷酸氢二钾和0.45g/L磷酸二氢钾，余量为水。

5.一种布劳特氏菌、尤其是延长布劳特氏菌的发酵方法，其包括高密度发酵步骤：将布劳特氏菌的种子液接种到权利要求1-4中任一项所述的发酵培养基中，并在例如20℃-40℃、优选36℃-38℃温度的厌氧环境条件下培养例如6h-18h。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述种子液以2％-10％、优选2％-4％的接种量接种。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述高密度发酵步骤还包括将发酵过程中的所述发酵培养基的pH控制为6-8，优选控制为6.0-7.5。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的方法，其中，所述高密度发酵步骤在转速为50-300rpm、优选50-150rpm的条件下进行。

9.根据权利要求5-8中任一项所述的方法，其还包括在所述高密度发酵前进行对菌种进行静置培养以得到布劳特氏菌的种子液，优选地，所述静置培养的条件包括在厌氧条件下、36-38℃、2-3次传代，每次传代的培养时间为12-36h。

10.根据权利要求5-9中任一项所述的方法，其中，所述高密度发酵采用补料分批发酵方式；所述补料例如是完全补料培养基或半分批补料培养基：如包括碳源如蔗糖和益生元如大豆低聚糖的不完全培养基；例如采用补料流速为2-6g·L^-1·h^-1的总糖速率进行缓慢连续补料。