[发明专利]基于工程化线粒体的肿瘤抗原递送系统及应用

权利要求书

1.肿瘤抗原递送系统，其特征在于：其包括转基因线粒体。

2.如权利要求1所述的肿瘤抗原递送系统，其特征在于：所述转基因线粒体是基于肿瘤抗原和慢病毒转染系统，构建提取的线粒体；优选地，所述肿瘤抗原选自OVA、TRP2、ROR-1、XPROTEIN、MUC 1、LMP1、LMP2、HPV E6/E7、EGFR、WT1、MAGE-A3、NY-ESO-1、HER2、CEA、gp100、PAP中至少一种；更优选地，所述肿瘤抗原为OVA、TRP2中至少一种。

3.如权利要求2所述的肿瘤抗原递送系统，其特征在于：所述转基因线粒体是以OTC序列和慢病毒转染系统，构建提取的线粒体。

4.如权利要求1所述的肿瘤抗原递送系统，其特征在于：所述肿瘤抗原递送系统是以OTC作为前导序列的质粒和慢病毒转染系统，构建表达肿瘤抗原的线粒体稳转细胞株，提取其中的线粒体作为肿瘤抗原的递送系统。

5.如权利要求4所述的肿瘤抗原递送系统，其特征在于：所述肿瘤抗原包括OTC前导序列和模板抗原，所述模板抗原包括OVA或TRP2；优选地，所述OTC前导序列如SEQ IDNO.1所示；更优选地，所述肿瘤抗原的序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。

6.构建肿瘤抗原递送系统的方法，其特征在于：包括以下步骤：构建含有肿瘤抗原序列的质粒，以慢病毒系统感染细胞，筛得在线粒体稳定表达肿瘤抗原的稳转株，再提取稳转株的线粒体，即可得到转基因线粒体。

7.如权利要求6所述的构建肿瘤抗原递送系统的方法，其特征在于：所述肿瘤抗原含有OTC序列和肿瘤抗原序列。

8.如权利要求7所述的构建肿瘤抗原递送系统的方法，其特征在于：肿瘤抗原序列选自OVA、TRP2、ROR-1、X PROTEIN、MUC 1、LMP1、LMP2、HPV E6/E7、EGFR、WT1、MAGE-A3、NY-ESO-1、HER2、gp100、PAP中至少一种；优选地，所述肿瘤抗原序列为OVA、TRP2序列中至少一种；进一步地，所述质粒选自昆虫杆状病毒表达载体、哺乳动物细胞表达载体、大肠杆菌表达载体、酵母表达载体中至少一种；优选地，所述质粒选自pCDH-CMV、pCDH-EF1、pCDH-MSCV、pCDH-RFP、pLV105载体中的任意一种。

9.肿瘤疫苗，其特征在于：含有权利要求1-5任一项所述的肿瘤抗原递送系统。

10.如权利要求9所述的肿瘤疫苗，其特征在于：所述肿瘤抗原递送系统包括转基因线粒体；优选地，所述转基因线粒体包括表达肿瘤抗原的线粒体；更优选地，是表达OVA的线粒体或表达TRP2的线粒体。

11.药物组合物，其特征在于：包含权利要求1-5任一项的肿瘤抗原递送系统、权利要求9-10任一项的肿瘤疫苗和药剂学上允许的辅料或辅助性成分。

12.如权利要求11所述的药物组合物，其特征在于：所述的辅料或辅助性成分为稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、保护剂、吸附载体或润滑剂中至少一种。

13.权利要求1-5任一项肿瘤抗原递送系统、权利要求9-10任一项的肿瘤疫苗，或者权利要求11-12任一项所述的药物组合物，与至少一种其它预防性疾病治疗药物的组合物在制备治疗和/或预防肿瘤药物中的用途。

14.如权利要求13所述的用途，其特征在于：所述其它预防性疾病治疗药物为抗PD-1抗体、抗PD-L1抗体、酪氨酸激酶抑制剂、VEGFR抑制剂、DC肿瘤疫苗或心磷脂中至少一种。