[发明专利]验证WNK1抑制剂在制备治疗认知障碍药物中的应用

说明书

本发明提供验证WNK1抑制剂在制备治疗认知障碍药物中的应用，其包括以下步骤：步骤一：制备精神分裂症大鼠模型和对照组大鼠；步骤二：通过前脉冲抑制实验验证精神分裂症大鼠模型相对于对照组大鼠存在认知损伤；步骤三：实验检测精神分裂症大鼠模型以及对照组大鼠的WNK1表达水平；步骤四：实验验证WNK463可改善精神分裂症大鼠模型认知损伤。本发明提供的实验方法证实了WNK1表达水平在精神分裂症大鼠模型中显著增加，而WNK1抑制剂WNK463可显著改善精神分裂症大鼠模型的认知损伤。故而，WNK1可作为精神分裂症认知改善药物靶点，并凸显了WNK463对于认知损伤的治疗价值。

技术领域

本发明属于精神病研究技术领域，具体涉及验证WNK1抑制剂在制备治疗认知障碍药物中的应用。

背景技术

精神分裂症患者临床症状包括阳性症状、阴性症状、认知损伤，其中认知损伤是影响患者社会功能恢复的主要限制因素。而现有的抗精神病药物可显著改善患者的阳性和阴性症状，但对认知损伤的改善效果并不理想。药物治疗无效的根源在于导致认知缺陷的分子机制不明，进而缺乏针对认知损伤的药物治疗。

前期本人制备精神分裂症大鼠模型，发现大鼠模型海马WNK1表达增加，故而猜想其异常表达与大鼠模型认知损伤相关，并通过实验进行验证。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，验证WNK1抑制剂在制备治疗认知障碍药物中的应用，具体方案如下：

验证WNK1抑制剂在制备治疗认知障碍药物中的应用，其特征在于包括以下步骤：

步骤一：制备精神分裂症大鼠模型和对照组大鼠；

步骤二：通过前脉冲抑制实验验证精神分裂症大鼠模型相对于对照组大鼠存在认知损伤；

步骤三：实验检测精神分裂症大鼠模型以及对照组大鼠的WNK1表达水平；

步骤四：将精神分裂症大鼠模型分为2组，其中一组连续3天腹腔注射WNK1抑制剂WNK463（3 mg/kg），另外一组给予安慰剂处理，同时给予对照组大鼠安慰剂处理，通过前脉冲抑制实验评估三组大鼠的高级认知。

基于上述，步骤一包括以下操作步骤：

步骤1：母体处理：模型组孕鼠在怀孕第9天一侧尾静脉注射10mg/kg的Poly I:C，对照组孕鼠在怀孕第9天一侧尾静脉注射等体积生理盐水处理；

步骤2：母体检测：3小时后在模型组孕鼠、对照组孕鼠的另一侧尾静脉分别抽取约1ml血液，并添加EDTA抗凝，4℃、1000g、离心15min，取上层血清，ELISA检测二者血浆炎症因子IL-6、TNF-α含量，当结果显示模型组孕鼠炎症因子IL-6、TNF-α水平显著升高时，提示模型组孕鼠免疫激活成功；

步骤3：将模型组孕鼠以及对照组孕鼠的子代雄性大鼠正常饲养至成年期，即为精神分裂症大鼠模型和对照组大鼠。

基于上述，所述步骤三中检测精神分裂症大鼠模型以及对照组大鼠的WNK1表达水平的实验方式为免疫印迹实验。

本发明相对现有技术具有突出的实质性特点和显著的进步，具体地说，本发明具有以下优点：

根据多次实验发现，WNK1表达水平在精神分裂症大鼠模型中显著增加，而WNK1抑制剂WNK463可显著改善精神分裂症大鼠模型的认知损伤，且起效周期短、改善效果高效、稳定。故而，本发明提供的实验方法证实了WNK1可作为精神分裂症认知改善药物靶点，并凸显了WNK463对于认知损伤的治疗价值。

附图说明

图1是本发明中ELISA检测孕期母体免疫激活状态的数据分析图。

图2是本发明中前脉冲抑制实验验证精神分裂症大鼠模型相对于对照组大鼠存在认知损伤的数据分析图。