[发明专利]UBA2-WTIP融合蛋白及其用途

说明书

本发明提供UBA2‑WTIP融合蛋白及其用途。所述的UBA2‑WTIP融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的UBA2‑WTIP融合蛋白能促进白血病细胞增殖，而WTIP则抑制白血病细胞增殖。免疫研究证明UBA2‑WTIP融合基因可以破坏P‑body形成，而且UBA2‑WTIP融合蛋白表达可以激活体内Hippo通路，从而促进白血病的发生发展。研究表明UBA2‑WTIP融合蛋白在AML样本中高表达。因此，UBA2‑WTIP融合蛋白及编码UBA2‑WTIP融合蛋白的mRNA和融合基因可在制备诊断和治疗癌症药物及药物筛选中应用。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及UBA2-WTIP融合蛋白及其用途。本发明所述的融合蛋白和编码该蛋白的mRNA和融合基因在制备癌症诊断和治疗药物及进行药物筛选中的用途。

背景技术

癌症是全球范围内主要的死亡原因之一，并且癌症的发病率和患病率持续增加(1)。慢性髓系白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)中BCR-ABL1和急性早幼系细胞白血病(acute promyelocytic leukemia，APL)中PML-RARα等致病性融合基因的发现，以及酪氨酸激酶抑制剂(Tyrosine kinase inhibitor，TKI)、全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid，ATRA)等小分子抑制剂的靶向治疗作用，掀开了肿瘤靶向治疗的新篇章。尽管已经在一些血液肿瘤和实体肿瘤中发现一些致病性融合基因及相应靶向药物，但大多数肿瘤仍然缺乏特异性融合基因靶点。

本领域需要通过新的筛选方法获得新的具有致病性融合蛋白及其相应mRNA和基因用于肿瘤诊断、治疗和药物筛选。

发明内容

本发明的目的是提供UBA2-WTIP融合蛋白，所述UBA2-WTIP融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的UBA2-WTIP融合基因由UBA2的16号外显子与WTIP的2号外显子发生融合而成，是编码区全长2367bp，编码一个788个氨基酸的融合蛋白。

本发明通过转录组测序从人白血病细胞中意外发现19号染色体上的一个染色体内融合基因UBA2-WTIP，且该融合基因发生在基因组水平融合，并通过分子克隆方法得到了UBA2-WTIP融合基因。

本发明的另一个目的是提供所述UBA2-WTIP融合蛋白在制备诊断和治疗癌症药物中的应用。

本发明在真核细胞293T内表达。UBA2-WTIP融合基因表达能在体外促进白血病细胞KG-1a增殖，并在体内促进KG-1a细胞成瘤能力。

在一个方面，本发明提供UBA2-WTIP融合基因形成后，P-body消失并呈细胞内弥散分布。

在一个方面，本发明提供UBA2-WTIP融合基因表达后，Hippo通路关键分子YAP1的表达上调，且激活的STAT3、STAT5、ERK等信号分子也明显上调。

在一个方面，本发明发现在44例AML中，UBA2-WTIP融合基因阳性的为13例，阳性率为29.55％，其中AML-M5占了UBA2-WTIP融合基因阳性的61.51％(8/13)。

在一个方面，本发明提供UBA2-WTIP融合基因阳性的病人外周血白细胞数明显高于UBA2-WTIP融合基因阴性的病人，且UBA2-WTIP融合基因阳性的病人预后差，易复发和产生耐药。

本发明的在一个目的是提供所述UBA2-WTIP融合蛋白在药物筛选中的应用。

在一个方面，本发明提供了一种用PCR技术从基因水平检测UBA2-WTIP融合基因方法，可用于人源样本的表达检测，进而应用于药物筛选及制备。

在一个方面，本发明提供了一种用RT-PCR技术从转录水平检测UBA2-WTIP mRNA方法，可用于人源样本的表达检测，进而应用于药物筛选及制备。