[发明专利]一种提高卵形鲳鲹成活率的养殖方法

权利要求书

1.一种提高卵形鲳鲹成活率的养殖方法，其特征在于：将卵形鲳鲹鱼苗投入养殖池，待鱼苗长至7-10cm时，向鱼苗腹腔注射磷酸锰胶体，注射剂量为每尾0.1ml；待鱼苗长至12-15cm时，向鱼苗皮下注射锰胶体佐剂抗刺激隐核虫疫苗，注射剂量为每尾0.1ml，疫苗注射14天后，进行加强免疫，即再次向鱼苗皮下注射锰胶体佐剂抗刺激隐核虫疫苗，注射剂量仍为每尾0.1ml。

所述磷酸锰胶体的制备方法如下：取15ml离心管，分别加入8ml蒸馏水、500ul 18％NaCl、500ul Na₃PO₄、1ml 0.2M MnCl₂，上下颠倒混匀20-30min后即可。

所述锰胶体佐剂抗刺激隐核虫疫苗的制备方法如下：(1)、首先用含青霉素、链霉素和两性霉素B的PYY培养液复苏实验室保存的嗜热四膜虫，30℃静置培养后将虫液转至NEFF培养基中；(2)四膜虫的扩大培养：往10mlNEFF培养基加入1ml复苏后的四膜虫，30℃、100rpm培养24h后将虫液转移至250ml NEFF培养基，继续培养24h后即可获得大量四膜虫；(3)四膜虫抗原的获取：将含大量四膜虫的培养基置于冰上静置10min后，低速离心去除培养基溶液；加入10mM Tris-HCl溶液清洗一遍后，加入30ml含10mM Tris-HCl、0.5M sucrose、0.2MCacl₂的缓冲液重悬四膜虫，将虫液等体积缓慢加入5％蔗糖溶液中，4000rpm水平离心15min后，取白色上层溶液即为免疫所用抗原；(4)、疫苗的制备：将抗原透析至0.9％NaCl溶液中，调节pH为7.0以及调节抗原浓度为2mg/L，随后与上述磷酸锰胶体等体积混匀。