[发明专利]添加外源物质促进螺旋藻产藻蓝蛋白的方法

说明书

本发明公开了一种添加外源物质促进螺旋藻产藻蓝蛋白的方法，包括以下步骤：(1)采用兼养培养模式，在培养基中培养螺旋藻；(2)将两种外源物质加入步骤(1)的培养基中进行微藻光自养培养；(3)待步骤(2)培养结束后，采收获得螺旋藻；(4)通过分离提取方法获得步骤(3)得到的螺旋藻的细胞中的藻蓝蛋白。本发明通过添加外源物质促进螺旋藻产生高附加值微藻生物质—藻蓝蛋白，螺旋藻藻蓝蛋白具有许多显著的功效，如抗氧化作用、抗癌作用和作为天然色素等，故螺旋藻藻蓝蛋白的应用相当广泛，具有较高的应用价值。通过外源物质的添加促进螺旋藻产蓝蛋白的方法具有高效性。

技术领域

本发明涉及微藻活性物质提取和藻类培养领域，具体涉及一种海洋微藻培养与通过外源物质促进微藻产藻蓝蛋白的方法。

背景技术

添加外源物质是促进生物量和藻蓝蛋白积累的有效途径。在培养基中补充矿物元素、有机酸和维生素可提高生物量和藻蓝蛋白产量。在螺旋藻的指数生长阶段，逐步添加硒(Se)，可以提升藻蓝蛋白的方法。通过添加谷氨酸钠和琥珀酸，营养富集诱导的代谢胁迫条件可以显著提高螺旋藻的生物量产量和藻蓝蛋白含量。因此，在培养基内添加外源物质对高效生产藻蓝蛋白至关重要。

微藻具有光能利用效率高、繁殖速度快、环境适应性强、生长周期短等特点，且富含蛋白质、不饱和脂肪酸和维生素等多种营养成分。同时，微藻可以快速利用利用外源物质产生活性产物。基于外源物质的添加利用微藻产活性产物技术是当前国内外研究的热点，该技术不仅可以获得的高产量的微藻生物质——可以直接作为饲料、饵料及肥料；也可以分离提取微藻中的天然活性物质，如藻蓝蛋白、不饱和脂肪酸等制备成高附加值产品。

藻胆蛋白有四种类型，即藻红蛋白、藻蓝蛋白、藻红蓝蛋白和异藻蓝蛋白。藻蓝蛋白具有良好的抗氧化剂和自由基清除活性.此外，藻蓝蛋白还具有其他种生物活性，如抗炎、抗癌、抗糖尿病、神经保护和保护肝作用。因此，藻蓝蛋白目前被广泛应用于食品、营养品、化妆品和制药等行业。

据此，针对微藻提取藻蓝蛋白效率低等问题，将基于添加外源物质促进微藻活性物质的产量应用到螺旋藻的培养产藻蓝蛋白的方法，促进螺旋藻产藻蓝蛋白。本发明用于海洋微藻的培养，通过外源物质的添加，获得高附加值的天然活性物质——藻蓝蛋白。并对现有微藻提取藻蓝蛋白的方法进行改进，利用螺旋藻生产藻蓝蛋白的方法或技术。

发明内容

本发明的目的是提供一种添加外源物质促进螺旋藻产藻蓝蛋白的方法，以解决现有技术中存在的微藻产藻蓝蛋白的成本高以及附加产值低的技术问题。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种添加外源物质促进螺旋藻产藻蓝蛋白的方法，包括以下步骤：

(1)采用兼养培养模式，在培养基中培养螺旋藻；

(2)将外源物质加入步骤(1)的培养基中，进行微藻光自养培养；

(3)待步骤(2)培养结束后，采收获得螺旋藻；

(4)通过分离提取方法获得步骤(3)得到的螺旋藻的细胞中的藻蓝蛋白。

所述步骤(1)中，兼养培养模式为自养培养，采用Zarrouk培养基，将其中的氯化钠浓度调整为185mM。

所述步骤(1)中，螺旋藻培养液pH调节至9.1-9.5。

所述步骤(1)中，螺旋藻藻种液的接入量为Zarrouk培养基体积的10％。

所述步骤(2)中，外源物质为百能饲和百能太的一种或两种混合，外源物质通过移液管加至Zarrouk培养基中培养螺旋藻。

所述步骤(2)中，将外源物质进行单独灭菌后再加入至Zarrouk培养基，杀菌消毒通过次氯酸钠法、紫外消毒法、高压灭菌任意一种或两种以上结合的方式。