[发明专利]一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用

说明书

本发明公开了一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用，其包括：切割穹窿海马伞后侧脑室灌注NGF，能提高海马齿状回中的ChAT活性；将Lhx8干扰慢病毒注入脑室灌注NGF的正常海马齿状回后，齿状回中Lhx8和ChAT基因和蛋白水平下调，且影响ChAT阳性的胆碱能神经元再生；将Lhx8干扰慢病毒注入脑室灌注NGF并切割穹窿海马伞侧的海马齿状回后，齿状回中Lhx8和ChAT基因和蛋白水平显著下调，且抑制了齿状回的胆碱能神经再生。本发明经过研究发现干扰Lhx8能显著影响海马区域内NSCs向胆碱能神经元分化，这一研究成果将为临床治疗阿尔茨海默病等神经退行性疾病提供新思路。

技术领域

本发明属于神经生物技术领域，具体涉及一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用。

背景技术

中枢神经系统(Central nervous system，CNS)损伤后的神经再生是长期困扰人类的一大难题。神经干细胞(Neural stem cells，NSCs)具备自我更新、多向分化潜能及迁移性等特征，使其成为人类神经系统损伤以及退行性疾病治疗的理想细胞。目前已知海马齿状回是干细胞的聚集区之一。

海马中的胆碱能投射纤维主要来源于基底前脑内侧隔核(Medial septalnucleus，MS)和斜角带垂直臂核(Nucleus of the vertical limb of the diagonalband，VDB)。MS、VDB与海马结构中的齿状回(Dentate gyrus，DG)之间的胆碱能投射系统进行性损伤可导致海马区域乙酰胆碱(Acetylcholine，ACh)递质水平异常，动物出现学习、记忆等认知功能障碍的表现。

基于以上背景，若能探明海马齿状回胆碱能神经再生情况及其机制，将为临床治疗阿尔茨海默病(Alzheimer Disease，AD)等神经退行性疾病提供新思路。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种控制海马胆碱能神经再生的方法和应用，发现了能够影响海马齿状回胆碱能神经再生的关键转录因子，即Lhx8(LIM homeboxprotein 8，LIM同源盒基因8)，并通过干扰Lhx8显著影响了海马区域内NSCs向胆碱能神经元分化，为神经退行性疾病治疗提供了新思路。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种控制海马胆碱能神经再生的方法，包括以下步骤：

步骤1)切割大鼠的穹窿海马伞后，侧脑室灌注5μL 2μg/μL的NGF，能提高大鼠的海马齿状回中的ChAT活性，从而促进海马胆碱能神经再生；

步骤2)将10μL Lhx8干扰慢病毒注入脑室灌注NGF的正常大鼠的海马齿状回后，大鼠的海马齿状回中Lhx8和ChAT基因及蛋白水平下调，且影响ChAT阳性的海马胆碱能神经元再生；

步骤3)将10μL Lhx8干扰慢病毒注入脑室灌注NGF并切割穹窿海马伞侧的大鼠的海马齿状回后，大鼠的海马齿状回中Lhx8和ChAT基因及蛋白水平显著下调，且抑制了齿状回的海马胆碱能神经再生。

优选地，所述Lhx8干扰慢病毒的滴度为8×10⁸TU/mL。

一种控制海马胆碱能神经再生的方法在制备神经退行性疾病的药物中的应用。

优选地，所述神经退行性疾病为阿尔茨海默病。

本发明的原理及有益效果如下：