[发明专利]反式-3-羟基-L-脯氨酸脱氢酶C14orf149在制备抗手足口病药物中的应用

说明书

本发明公开了一种干扰素刺激基因c14orf149编码的反式‑3‑羟基‑L‑脯氨酸脱氢酶C14orf149在制备抗手足口病药物中的应用。所述C14orf149蛋白通过抑制EV71‑5’UTR起始翻译活性而发挥显著的抗肠病毒EV71活性，具有开发为治疗手足口病的药物的潜在应用价值。

技术领域

本发明属于医药新用途领域。更具体地，涉及反式-3-羟基-L-脯氨酸脱氢酶C14orf149在制备抗手足口病药物中的一种新用途。

背景技术

手足口病(HFMD)是由肠道病毒引起的急性传染病，主要在5岁以下儿童中发病。HFMD主要临床症状为手、足、口腔等部位斑丘疹、疱疹，重症患者可出现严重的神经系统疾病，甚至死亡。引发HFMD的肠道病毒有20多种(型)，肠道病毒71型(EV71)是最为常见的一种，其它不同型的肠道病毒和柯萨奇病毒也可致病。EV71具有高度传染性，感染呈全球性分布，特别是在亚太地区，所引起的手足口病已成为一种严重危害社会公众健康的疾病。由于缺乏特异、高效的抗病毒药物，根据手足口病诊疗指南(2018年版)，目前主要采取隔离和对症治疗。因此，急需抗EV71等肠病毒药物的研制与开发。

肠道病毒是非包膜的RNA正链病毒，是一种二十面体病毒颗粒，由四种结构蛋白VP1、VP2、VP2、VP3、VP4组成病毒衣壳结构。EV71病毒主要使用宿主编码的受体清清夫受体B类成员2(SCARB2)为受体与宿主细胞结合。与受体结合后，病毒粒子通过内吞作用进入细胞；内吞小体的酸性环境促进了病毒颗粒的脱壳和病毒RNA的释放；正链RNA通过位于其5‘-非翻译区(5’-UTR)的内部核糖体进入位点(IRES)来指导病毒蛋白的翻译；合成的病毒多聚蛋白经病毒编码的蛋白酶2A和3C作用后切割成功能蛋白；病毒外壳与病毒基因组RNA组装成熟的病毒颗粒，经宿主细胞裂解后释放。

宿主细胞通过膜表面模式识别受体特异性结合病毒的模式分子来感知病毒感染，并激活干扰素(IFN)转录表达；IFN蛋白合成分泌后激活细胞的IFN信号通路促使细胞产生抗病毒应答，其中干扰素刺激基因(ISG)的表达上调发挥了关键的抗病毒作用。c14orf149基因是一种新型ISG，位于人类基因组第十四号常染色体上第149个开放阅读框，基因全长1062个碱基，编码反式-3-羟基-L-脯氨酸脱氢酶，全长354个氨基酸。通过人类全基因组RNAi筛选技术对c14orf149基因表型进行研究，发现C14orf149可能具有增加组蛋白H2A家族的成员X磷酸化水平和增加细胞G1期DNA含量的功能。研究发现c14orf149的表达受IFN的调控，细胞经IFN-α2b刺激后，c14orf149的表达显著上调。C14orf149蛋白作为一种ISG，是否具有抑制非包膜病毒如EV71或其他肠道病毒的活性，尚未见任何相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种反式-3-羟基-L-脯氨酸脱氢酶C14orf149的新用途，即抗肠病毒EV71，从而用于制备治疗手足口病的药物，同时为手足口病药物研发提供可能的作用靶位和新思路。

为达到上述目的，本发明采取的技术方案为：

本发明提供了一种反式-3-羟基-L-脯氨酸脱氢酶C14orf149在制备抗肠病毒感染所致手足口病药物中的应用。

进一步的，所述肠病毒肠道病毒71型。

本发明鉴定出C14orf149蛋白具有抗肠道病毒EV71的活性；重要的是，C14orf149蛋白具有开发为手足口病治疗药物的潜在应用价值，为手足口病治疗提供了一种新策略和新思路。

附图说明

图1C14orf149稳定表达细胞株293A-SCARB2-C14orf149的抗肠病毒活性分析；将EV71-MZ分别感染293A-SCARB2-TMEM106A细胞和表达空白载体的对照细胞(293A-SCARB2)，MOI为5；感染后2h、4h、6h、8h、10h和12h分别取上清，用TCID50检测不同时间点的病毒产量，绘制生长曲线。数据为三次独立实验的平均值±标准差。