[发明专利]一种皮肤感染性压疮动物模型的构建方法及其应用

说明书

本发明公开了一种皮肤感染性压疮动物模型的构建方法及其应用。本发明通过两个圆形磁铁夹小鼠背部皮肤的方法模型临床上压疮的发病过程，利用3‑氨基‑1,2,4‑三唑(ATZ)抑制过氧化氢酶，巯基琥珀酸(MSA)抑制谷胱甘肽过氧化物酶，提高损伤部位的过氧化氢，造成高水平氧化应激，并对伤口进行3M膜覆盖，延缓伤口愈合，促进伤口部位菌群的定植，自然形成多菌种感染伤口，降低小鼠模型的死亡率；最终形成了与临床病人压疮形成类型的模型伤口，可以用于研究皮肤压疮发生发展的分子机制、制备和/或筛选预防和/或治疗皮肤压疮的药物或优化手术治疗方案。

技术领域

本发明属于动物模型技术领域，具体涉及一种皮肤感染性压疮动物模型的构建方法及其应用。

背景技术

近年来，随着老龄化的加速到来，卧床的病人越来越多，压疮等感染性伤口发病率越来越高，严重影响人们健康。随着抗生素耐药性日益严重，感染性压疮的临床治疗效果不理想，尽管在了解感染性压疮如何发展方面投入了大量时间和精力，但基本问题仍未得到解答。其原因之一就是没有良好的动物模型。

目前所用的皮肤感染性压疮动物模型具体制作如下：1、动物皮肤全层切除形成伤口后，向伤口部位定植已知的金葡菌、铜绿、大肠杆菌等形成感染。这种皮伤口感染菌群比较单一，和临床伤口存在多种菌群感染的现状不相符；2、动物皮肤全层切除形成伤口后，向伤口内移植肠道内容物(粪便)或污染的海水形成感染。这种皮肤伤口感染虽然可以形成多种菌群感染，但是其感染的菌群与皮肤伤口自然形成的菌群存在很大的差异；3、利用糖尿病动物模型，切除皮肤全层形成伤口后，腹腔注射和伤口涂抹促氧化应激药物各一次，自然形成伤口感染。这种皮肤伤口感染模型可以形成类似人类皮肤伤口自然感染的菌群，但是这种模型是切割形成的皮肤伤口，与压疮形成完全不同，而且小鼠的死亡率比较高。

因此需要构建一种不需要切割，可以自然形成的皮肤感染性压疮动物模型。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型的自然形成的皮肤感染性压疮动物模型。

本发明所采取的技术方案是：

一种皮肤感染性压疮动物模型的构建方法，包含以下步骤：

S1：选取实验小鼠，连续多天注射3-氨基-1,2,4-三唑，在最后一天麻醉小鼠后注射3-氨基-1,2,4-三唑；

S2：注射3-氨基-1,2,4-三唑后将小鼠的背部正中两侧皮肤提起成条状，两侧对称放置磁铁，使磁铁夹持条状皮肤，维持8-24h后去掉磁铁，在夹持的皮肤处涂或者注射抹巯基琥珀酸，重复2-4天；

S3：重复2～4天后将伤口部位使用医用3M透明膜覆盖14-28天，即获得压疮动物模型。

在本发明的一些实施方式中，步骤S1中所述实验小鼠为7周-15月龄小鼠，可模拟从小鼠成年到中老年状态。

在本发明的一些实施方式中，步骤S1中所述实验小鼠在开始造模前0.5～1.5个月进行开放式饲养。

在本发明的一些实施方式中，所述饲养的条件为：饲养笼是开放式，温度18-22，湿度40％-70％。

在本发明的一些实施方式中，所述小鼠包括C57BL/6小鼠、KM小鼠或ICR小鼠。

在本发明的一些实施方式中，步骤S1中所述注射包括腹腔注射、皮下注射。

在本发明的一些优选实施方式中，步骤S1中所述注射为腹腔注射，步骤S2中所述注射为皮下注射。

在本发明的一些实施方式中，步骤S1中所述麻醉时使用的麻醉剂包括：戊巴比妥钠，异氟烷，三溴乙醇，氯胺酮(K)、甲苯噻嗪(X)、乙酰丙嗪(A)中的至少一种。

在本发明的一些实施方式中，所述戊巴比妥钠的剂量为30-90mg/kg。