[发明专利]一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法及其在串联反应中的应用

权利要求书

1.一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)分别将甲氧基聚乙二醇丙醛和葡萄糖氧化酶加入到1mL pH为5的盐酸缓冲溶液中，轻轻震荡使其溶解，之后在室温下静置反应48h，反应完成后，将所得溶液用MW为8000的透析袋在去离子水中透析一夜去除杂质，然后放入鼓风干燥箱中，在37℃下烘干成固体颗粒，得到双水相乳液乳化剂；

2)将聚乙二醇水溶液和葡聚糖水溶液充分震荡涡混后，在室温下静置一夜，得到成双水相体系，将步骤1)得到的双水相乳液乳化剂加入到双水相体系中，涡混2min，形成双水相乳液；

3)向步骤2)形成的双水相乳液中加入2mg辣根过氧化物酶，充分涡混2min后，再加入海藻酸钠水溶液，再充分涡混，将混匀后的混合溶液滴加到氯化钙水溶液中进行凝胶化反应，从而实现了将两种酶分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中。

2.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤1)中，按质量比，甲氧基聚乙二醇丙醛:葡萄糖氧化酶＝1:1。

3.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤2)中，所述聚乙二醇水溶液的配制方法为：称取0.5667g聚乙二醇溶于2.766mL水中；所述葡聚糖水溶液的配制方法为：称取0.5333g葡聚糖溶于2.8mL水中；所述聚乙二醇水溶液和葡聚糖水溶液的体积比为1:1。

4.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤2)中，所述双水相乳液乳化剂按照质量比0.3％-0.5％加入到双水相体系中。

5.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤3)中，所述海藻酸钠水溶液的配制方法为：称取1g海藻酸钠溶于49mL水中；所述氯化钙水溶液的配制方法为：称取氯化钙2.5g溶于47.5mL水中。

6.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤3)中，所述双水相乳液和海藻酸钠水溶液的体积比为2:5。

7.根据权利要求1所述的一种将催化剂分隔负载在凝胶-乳液复合微粒中的方法，其特征在于，步骤3)中，所述凝胶化反应时间为10min。

8.一种分隔负载两种酶的凝胶-乳液复合微粒，其特征在于，是通过权利要求1-7中任意一项所述的方法制备的。

9.权利要求8所述的一种分隔负载两种酶的凝胶-乳液复合微粒在串联反应中的应用，其特征在于，方法如下：向10mL磷酸缓冲溶液中加入0.01g 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺，溶解后，再加入0.05g葡萄糖，形成混合溶液后，直接将分隔负载两种酶的凝胶-乳液复合微粒投入其中，从而发生一锅式串联反应。

10.根据权利要求9所述的一种分隔负载两种酶的凝胶-乳液复合微粒在串联反应中的应用，其特征在于，所述磷酸缓冲溶液的配制方法为：将0.936g磷酸二氢钠溶于水中，定容至100mL，得到溶液Ⅰ；将2.148g磷磷酸氢二钠溶于水中，定容至100mL，得到溶液Ⅱ；将溶液Ⅰ和溶液Ⅱ按照体积比20:1混合均匀。