[发明专利]一种抗人CD209和CD209L的单克隆抗体、试剂及其应用

说明书

本发明公开了一种抗人CD209和CD209L的单克隆抗体、试剂及其应用，涉及生物医学技术领域。本发明为通过受体CD209和CD209L感染细胞的病原体感染提供了新的预防和治疗方案，抗人CD209和CD209L的单克隆抗体能够特异性识别CD209和CD209L，并与CD209和CD209L结合，从而封闭了人细胞表面受体CD209和CD209L，使得病原体的蛋白无法结合人细胞表面受体CD209和CD209L，阻断了这一类通过CD209和CD209L受体感染宿主的病原体感染宿主细胞。此外，本发明提供的单克隆抗体可用于人CD209和CD209L蛋白的检测。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体而言，涉及一种抗人CD209和CD209L的单克隆抗体、试剂及其应用。

背景技术

新冠病毒(SARS-CoV-2)持续性大流行对全球公共卫生构成严重威胁，对全球社会经济造成严重破坏。病毒通常是通过与宿主细胞表面的受体结合进入细胞，进而导致病毒感染的发生，SARS-CoV-2也不例外。血管紧张素转换酶2(ACE2)是首先被鉴定的SARS-CoV-2侵染宿主细胞的主要受体，SARS-CoV-2通过其表面糖蛋白Spike的受体结合域(RBD)与ACE2结合介导病毒进入宿主细胞[1]。但有研究发现在缺乏ACE2表达的免疫和非免疫细胞中也存在新冠病毒的易感性，说明spike蛋白可能利用其他受体进行感染。

随着研究的不断深入，越来越多的新冠病毒受体被鉴定出来，其中包括C型凝集素受体家族的两个分子CD209/DC-SIGN和CD209L/L-SIGN[2,3]。CD209与CD209L具有77％的氨基酸序列同一性，其中CD209主要表达在树突状细胞，CD209L则主要在人肝窦内皮细胞(LSEC)、淋巴内皮细胞和肺内皮细胞中表达。CD209与CD209L均是II型跨膜糖蛋白受体，它们的胞外域是由颈部区域和碳水化合物识别域(CRD)组成，其中颈部区域是23个氨基酸的重复序列，主要参与蛋白质二聚化或寡聚化，CRD则对于CD209和CD209L识别病原体上特定糖蛋白上存在的甘露糖结构至关重要。SARS-CoV-2刺突蛋白的N-糖基化主要是寡甘露糖型聚糖，这可能是SARS-CoV-2刺突蛋白与CD209和CD209L存在强结合的原因[4]。作为人类基因组中最常见的病原体识别受体成员，除SARS-CoV-2外，CD209和CD209L还可以作为SARS-CoV、埃博拉病毒、登革热病毒、HIV、流感病毒、丙型肝炎病毒等的受体介导病毒顺式或反式感染细胞[5]。因此，CD209和CD209L是抗病毒药物研究中很有前景的治疗靶点。

自从1986年第一个鼠源性单克隆抗体药物Muromonab OKT3问世以来，越来越多的单抗药物相继被批准用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病和移植排斥反应等多种疾病，同时还有众多单克隆抗体正处于临床研究的不同阶段。因此，单抗药物已经成为生物医药的重要组成部分。目前市面上还没有针对SARS-CoV-2的特效药物，而已有的针对SARS-CoV-2的疫苗和靶向spike蛋白的封闭抗体随着病毒变体的不断出现其有效性也逐渐受到限制。由于新冠病毒感染细胞需要通过Spike蛋白与宿主细胞表面受体(例如，ACE2、CD209、CD209L等)结合，故利用受体的阻断性单克隆抗体同样可以阻断新冠病毒的感染，并且相对病毒疫苗和Spike蛋白的封闭抗体,针对病毒受体的阻断抗体对不断出现的病毒变体产生耐药性的可能性也会大大降低。另外，针对受体的阻断抗体不仅能够阻断新冠病毒感染宿主细胞，还能够阻断其它通过该受体感染宿主细胞的病毒。

我们和另外一个研究组发现针对受体ACE2的阻断性抗体对SARS-COV和SARS-COV-2以及SARS-COV-2的多种变体均有阻断效果就证实了这两点[6-8]。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容