[发明专利]类风湿因子测定试剂盒

说明书

本发明涉及体外诊断技术领域，特别涉及类风湿因子测定试剂盒。本发明提供了酸性缓冲液在提高RF解离剂解离效果中的应用，以及类风湿因子试剂和/或试剂盒，相比现有试剂，显著提高了胶乳试剂的准确度。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，特别涉及类风湿因子测定试剂盒。

背景技术

临床上类风湿因子(RF)的增高可见于多种疾病，其中在类风湿关节炎患者中的阳性率最高，是诊断类风湿关节炎的血清学标志之一。

RF本质上是一种免疫球蛋白，属于一种自身免疫性抗体。据文献记载，其产生的原因可能是由于细菌、病毒、支原体等的持续感染，此时具有遗传易感性的个体在抑制性T细胞功能低下时，B细胞增殖活化，诱发正常IgG的分子结构改变，成为一种自身抗原，B细胞以此IgG为抗原，刺激浆细胞产生各类抗IgG的抗体，即RF。RF能识别变性IgG Fc段的CH2、CH3，与其形成免疫复合物，激活补体，引起组织损伤。RF阳性率在正常人2％，老年人5％，而类风湿性关节炎(RA)患者可高达80％。RF是RA患者体内发现的最有诊断价值的自身抗体。

目前测定RF常用的方法为胶乳免疫比浊法，其原理是通过制备一种包被有人类IgG的胶乳悬浮液，当含有类风湿因子的血清与此胶乳试剂混合时，抗原抗体特异性结合导致浊度升高，从而得到血清中RF的浓度。胶乳比浊法重复性好、反应速度快，而且易于自动化和标准化，目前应用比较广泛。但近年来市售的类风湿因子(RF)测定试剂盒大多存在临床比对准确度低的问题。其原因主要在于：血清中的RF主要以两种形式存在，一是游离的RF，二是与变性IgG形成免疫复合物，RF发生免疫复合物反应后，其结合位点被封闭，无法被常规胶乳免疫比浊法检出，此现象被称为隐匿性RF(HRF)，会使得测定值低于真实值，影响临床比对准确度。因此，如何满足高准确度成为了一个急需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了类风湿因子测定试剂盒，其具有准确性好的优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了类风湿因子测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂；

所述R1试剂包括缓冲液和RF解离剂；

所述R2试剂包括缓冲液、RF抗原标记的胶乳微球；

所述RF解离剂包括尿素或非离子表面活性剂。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒中所述非离子表面活性剂为TritonX-100或Tween 80。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述R1试剂的酸碱度为酸性。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述R1试剂还包括稳定剂、表面活性剂、盐、增敏剂或防腐剂中的一种或多种；

所述R2试剂还包括稳定剂、表面活性剂、糖类或防腐剂中的一种或多种。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述R1试剂中酸性的缓冲液包括柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液或磷酸盐缓冲液中的一种或多种。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述R2试剂中的所述缓冲液包括PB缓冲液、Tris缓冲液或HEPES缓冲液中的一种或多种。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述稳定剂包括BSA、酪蛋白或脱脂奶粉中的一种或多种。

在本发明中的一些具体实施方案中，上述类风湿因子测定试剂盒的所述表面活性剂包括Tween 20、Brij L23中的一种或二种。