[发明专利]一种谷物耐热脂肪酶的提取方法

说明书

本发明公开了一种谷物耐热脂肪酶的提取方法，涉及生物提取技术领域。该提取方法包括以下步骤：(1)将谷物糠麸进行高温稳定化处理，得到稳定化糠麸；(2)利用含有表面活性剂的溶液对所述稳定化糠麸进行提取，得到所述谷物耐热脂肪酶。本发明提取方法的优点在于：(1)通过在缓冲液中添加表面活性剂的方式可以从稳定化糠麸中提取得到耐热脂肪酶；(2)所提取的脂肪酶耐热性好，提取方法简单。本发明为探讨谷物耐热脂肪酶的酶学特性，从而丰富谷物内源脂肪酶的类型，为谷物糠麸高效稳定化加工技术研发提供理论基础指导。

技术领域

本发明涉及生物提取技术领域，特别是涉及一种谷物耐热脂肪酶的提取方法。

背景技术

水稻、小麦是我国主要的粮食作物，其加工过程中产生了大量副产物糠麸，糠麸含有丰富的优质蛋白质、油脂、膳食纤维、维生素和矿物质，极具开发价值。尽管如此，目前糠麸加工副产物绝大多数用于饲料，高值化利用水平低，严重影响了粮食加工企业的经济效益。

限制糠麸精深加工利用的瓶颈在于其极易发生氧化酸败。糠麸含有丰富的油脂，占比15-20％(w/w)，在内源酶作用下发生强烈水解氧化反应，引起糠麸快速酸败变质，产生有毒有害成分，影响其高值化利用。一系列生物、物理和热加工等处理方法被用于钝化糠麸脂肪酶，提高其贮藏稳定性，其中热处理钝化糠麸内源酶的方法效果较好，但即便如此，稳定后的糠麸仍然残留约10-20％的脂肪酶活，影响了糠麸长期贮藏稳定性。

以米糠为例，目前已有研究报道了7种米糠来源的脂肪酶，其中6种属于常温脂肪酶，其最适反应温度和热稳定性都介于30-50℃之间，仅Bhardwaj等报道的(Phospho)Lipase其最适反应温度为80℃，60℃内热稳定性良好，超过60℃则热稳定性显著降低(表1)。这些结果表明，已报道的米糠脂肪酶对热的耐受性并不突出，使用121℃、20min的高压蒸汽处理理应能够完全灭活米糠中的脂肪酶，但事实上该法处理的米糠仍残留10-15％的脂肪酶活性，究其原因可能与米糠含有的耐热脂肪酶未被发现有关。

表1不同米糠脂肪酶特性概览

有限于此，本发明旨在挖掘谷物糠麸中耐热脂肪酶的提取方法，从而为开发高效的谷物糠麸稳定化方法提供理论基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种谷物耐热脂肪酶的提取方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明的提取方法可以从谷物糠麸中高效提取得到耐热脂肪酶，从而丰富谷物内源脂肪酶的类型，为谷物糠麸高效稳定化加工技术研发提供理论基础指导。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种谷物耐热脂肪酶的提取方法，包括以下步骤：

(1)将谷物糠麸进行高温稳定化处理，得到稳定化糠麸；

(2)利用含有表面活性剂的溶液对所述稳定化糠麸进行提取，得到所述谷物耐热脂肪酶。

进一步地，在步骤(1)中，所述高温稳定化处理的温度为100-130℃，时间为10-30min。

进一步地，在步骤(2)中，所述溶液为磷酸盐、柠檬酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)、HEPES等缓冲液中的一种。

进一步地，在步骤(2)中，所述表面活性剂为阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂和非离子型表面活性剂中的至少一种。

进一步地，所述阴离子表面活性剂为十二烷基硫酸钠。

进一步地，所述阳离子表面活性剂为三甲基1-十六烷基溴化铵。

进一步地，所述非离子型表面活性剂为曲拉通X-100。

进一步地，在步骤(2)中，所述稳定化糠麸与含有表面活性剂的溶液的质量体积比为1：(5-10)mL。