[发明专利]一种用于治疗牙周炎的活性物质及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于治疗牙周炎的活性物质及其制备方法和应用。一种用于治疗牙周炎的活性物质，其特征在于所述的活性物质主要通过以下方法制备得到：小檗碱预处理人骨髓间充质干细胞，PBS冲洗人骨髓间充质干细胞后将人骨髓间充质干细胞在α‑MEM培养基中孵育10‑15小时，收集上清即得所述的活性物质。本发明活性物质可治疗因慢性牙周炎导致的牙周组织破坏及牙槽骨丧失等严重的炎症反应，恢复牙槽骨正常骨高度，避免了因骨丧失发生的牙齿脱落。

技术领域

本发明属于生物药物技术领域，涉及一种用于治疗牙周炎的活性物质及其制备方法和应用。

背景技术

慢性牙周炎是导致现代成年人牙齿脱落的主要原因之一，其中牙周组织的炎症性损伤及牙槽骨的丧失是慢性牙周炎的主要表现。尤其是牙槽骨的丧失是牙周炎进展的重要标志。因此，抑制牙周炎进展过程中的牙槽骨吸收，及促进牙周炎患者的牙槽骨新生是牙周炎临床诊疗过程中的关键挑战。

牙周炎过程中的牙槽骨破坏由牙周炎相关微生物的作用和自身免疫反应两方面介导。一方面，牙周炎相关致病菌对牙周组织的侵入和致病菌衍生的脂多糖等代谢产物对牙周组织进行直接破坏。另一方面，自身免疫系统的调节对牙槽骨及牙周组织的破坏也起着相关作用，其中巨噬细胞的极化过程参与了骨吸收发生过程的调节，在极化过程中M1相巨噬细胞释放的IL-1β、IL-6等促炎因子加速了炎症的进展，加重了牙槽骨的丧失。而M2相的巨噬细胞释放的TGF-β、IL-10等抗炎因子可以抑制骨吸收过程中的关键细胞破骨细胞的活性及对抗炎症因子及相关酶对组织的破坏，从而调节牙周炎病程中成骨破骨水平的平衡，减缓牙周炎病程中的牙槽骨丧失及促进新骨形成。鉴于牙周炎的主要致病机制，目前在临床上对于牙周炎的主要治疗手段是通过机械清除手段来清除菌斑生物膜联合抗生素的应用来清除牙周致病菌以控制牙周炎的进展，并未出现有效的生物活性制剂来调控自身的免疫系统来进行牙周炎的治疗和促进牙槽骨的再生。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种用于治疗牙周炎的活性物质。

本发明的另一目的是提供该活性物质的应用。

本发明的又一目的是提供利用该活性物质制备的治疗牙周炎的制剂。

一种用于治疗牙周炎的活性物质，所述的活性物质主要通过以下方法制备得到：小檗碱预处理人骨髓间充质干细胞，PBS冲洗人骨髓间充质干细胞后将人骨髓间充质干细胞在α-MEM培养基中孵育10-15小时，收集上清即得所述的活性物质。

作为本发明的一种优选，所述的活性物质为收集的上清的冻干。

作为本发明的一种优选，所述的小檗碱预处理人骨髓间充质干细胞条件为：小檗碱在37℃处理HBMSCs 45-50小时，小檗碱在培养基中的终浓度为8-15μM，优选10μM。

一种制备所述的用于治疗牙周炎的活性物质组合物的方法，包含以下步骤：1)小檗碱溶解于甲醇中，浓度为8-15mM。

2)使用小檗碱(BBR)预处理生长汇合度达75％-85％的骨髓间充质干细胞，小檗碱加入培养基中的终浓度为8-15μ；

3)预处理结束后用PBS冲洗骨髓间充质干细胞，骨髓间充质干细胞在α-MEM培养基中孵育10-15小时，收集上清；

4)收获上清。

作为本发明的一种优选，所述的方法还包含步骤5)将步骤4)收获的上清冷冻干燥22-25h后收集所获冻干粉备用。

作为本发明的一种优选，所述的小檗碱预处理人骨髓间充质干细胞条件为：小檗碱在37℃处理HBMSCss 45-50小时，小檗碱在培养基中的终浓度为8-15nM，优选10nM。

本发明所述的活性物质在制备治疗牙周炎的药物中的应用。

一种用于治疗牙周炎的药物制剂，包含本发明所述的活性物质。