[发明专利]转录因子Tbx20启动子区G4调控元件在害虫防治中的应用

说明书

本发明公开了转录因子Tbx20启动子区G4调控元件在害虫防治中的应用，所述转录因子Tbx20启动子区G4调控元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明公开了转录因子Tbx20启动子区G4调控元件在害虫防治中的应用，通过靶标基因筛选并结合CRISPR/Cas9技术敲除Tbx20启动子区的G4调控元件，得到Tbx20‑G4突变体，将其进行表型及遗传性能测定，发现Tbx20启动子区的G4敲除后严重影响害虫孵化率，羽化率：同时可导致幼虫期大量死亡，可有效用于害虫防治。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及转录因子Tbx20启动子区G4调控元件在害虫防治中的应用。

背景技术

草地贪夜蛾，夜蛾科，灰翅夜蛾属，学名为Spodoptera frugiperda。草地贪夜蛾是一类杂食性农业害虫，原产于美洲热带和亚热带地区。近年来，它广泛入侵并分布在非洲和亚洲等亚热带地区。草地贪夜蛾具适生区域广、寄主范围宽、增殖潜能强、扩散速度快、突发危害重等显著生物学优势，对农业生产造成了极大的危害，造成了巨大的经济损失，防控难度大。研究影响草地贪夜蛾生长发育的相关结构有利于为草地贪夜蛾的防治提供参考依据。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出转录因子Tbx20启动子区G4调控元件，调控基因或其编码蛋白、或含有所述基因的生物材料的应用。

本发明还提出一种转录因子的抑制剂。

本发明还提出一种上述抑制剂的应用。

本发明还提出一种CRISPR/Cas9敲除的靶区域系统。

本发明还提出一种试剂盒。

本发明还提出一种防治有害昆虫的方法。

根据本发明的第一方面，提出了转录因子Tbx20启动子区G4调控元件，调控基因或其编码蛋白、或含有所述基因的生物材料，在以下任一项中的应用：

(1)制备降低害虫产卵量产品；

(2)制备用于降低害虫卵的孵化率的产品；

(3)制备用于阻止害虫变态发育的产品；

(4)制备用于阻止害虫羽化的产品；

(5)制备防治害虫的产品；

所述转录因子Tbx20启动子区G4调控元件的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

在本发明的一些实施方式中，所述害虫为鳞翅目害虫。

在本发明的一些实施方式中，所述害虫为夜蛾。

在本发明的一些实施方式中，所述害虫为草地贪夜蛾。

在本发明的一些实施方式中，所述生物材料为质粒、表达载体或转基因细胞。

在本发明的第二方面，提出了一种转录因子Tbx20启动子区G4调控元件的抑制剂，所述抑制剂用于抑制调控转录因子Tbx20的蛋白表达。

在本发明的一些实施方式中，所述抑制剂为干扰分子或CRISPR/Cas9系统的抑制靶标或沉默靶标。

在本发明的一些实施方式中，所述干扰分子为靶向转录因子Tbx20启动子区G4调控元件的dsRNA、miRNA、核酶和shRNA中的至少一种。

在本发明的一些实施方式中，所述CRISPR/Cas9系统的抑制靶标或沉默靶标为靶向Tbx20启动子区G4调控元件的sgRNA。

在本发明的一些实施方式中，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。