[发明专利]一种筛选培养基及其配制方法

说明书

本发明属于生物工程技术领域，公开了一种筛选培养基及其配制方法，所述培养基成分具体为：每L含有N‑乙酰‑L‑苯丙氨酸1.8‑2.5g，酵母提取物0.5‑1.5g，NH₄Cl 1.5‑2.5g，NaH₂PO₄0.08‑0.16g，MgSO₄0.05‑0.15g，Na₂HPO₄0.05‑0.15g，琼脂粉15‑25g，氯霉素0.01‑0.05g，多氧霉素0.01‑0.05g。相比于传统培养基，利用本发明培养基转化N‑乙酰‑L‑苯丙氨酸的成功率由0.59％提升到3.2％，加入的氯霉素和多氧霉素是真菌抑制剂，可以有效的抑制霉菌和酵母的生长提高筛选效率，进而提高筛选出产细菌(+)γ‑内酰胺酶的细菌的效率。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，涉及一种筛选培养基及其配制方法，具体是一种细菌(+)γ-内酰胺酶筛选培养基。

背景技术

光学纯的(-)γ-内酰胺是制备抗病毒药物的手性中间体，是抗艾滋病药物(-)阿巴卡韦和(-)卡巴韦的合成原料，也是抗流感药物帕拉米韦的合成原料。

(+)γ-内酰胺酶能够高效率动力学拆分外消旋体γ-内酰胺，获得光学纯的(-)γ-内酰胺。运用生物酶法进行工业化生产(-)γ-内酰胺，具有反应条件温和，产物光学纯度高，环境友好等优点。现有的(+)γ-内酰胺酶生产菌株较少，传统的筛选培养基周期长，特异性不高。因此，需要寻求一种新的(+)γ-内酰胺酶筛选培养基以便于高效筛选获得目的菌株。

发明内容

为解决现有技术中的问题，本发明提供一种筛选培养基及其配制方法。

本发明采用以下技术方案：

一种筛选培养基，所述培养基成分为：N-乙酰-L-苯丙氨酸、酵母提取物、NH₄Cl、NaH₂PO₄、MgSO₄、Na₂HPO₄、琼脂粉，所述培养基成分还可以包括氯霉素和多氧霉素。

上述一种筛选培养基，所述培养基成分具体为：每L含有N-乙酰-L-苯丙氨酸1.8-2.5g，酵母提取物0.5-1.5g，NH₄Cl 1.5-2.5g，NaH₂PO₄0.08-0.16g，MgSO₄0.05-0.15g，Na₂HPO₄0.05-0.15g，琼脂粉15-25g，氯霉素0.01-0.05g，多氧霉素0.01-0.05g。

上述一种筛选培养基，每L含有N-乙酰-L-苯丙氨酸2g，酵母提取物1g，NH₄Cl 2g，NaH₂PO₄0.1g，MgSO₄0.1g，Na₂HPO₄0.1g，氯霉素0.01g，多氧霉素0.01g，琼脂粉20g。

上述一种筛选培养基的配制方法，所述方法步骤如下：按比例取N-乙酰-L-苯丙氨酸、酵母提取物、NH₄Cl、NaH₂PO₄、MgSO₄、Na₂HPO₄、琼脂粉，加入1.0g大黑山土壤土样搅拌至溶解，调节pH 6.8-7.4，灭菌后加入经氯霉素、多氧霉素即得。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

相比于传统培养基，利用本发明培养基转化N-乙酰-L-苯丙氨酸的成功率由0.59％提升到3.2％，加入的氯霉素和多氧霉素是真菌抑制剂，可以有效的抑制霉菌和酵母的生长提高筛选效率，进而提高筛选出产细菌(+)γ-内酰胺酶的细菌的效率。

具体实施方式