[发明专利]一种全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法

权利要求书

1.一种全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)水样依次经前处理和萃取，得到浓缩液；

(2)采用超高效液相色谱-离子淌度-四级杆飞行时间质谱仪对浓缩液进行测定，得到质谱数据；

(3)对上述质谱数据进行处理，然后进行全氟和多氟烷基物质及其异构体的非靶向筛查；其中，质谱数据处理包括：1)将质谱数据进行色谱峰处理，应用4D峰提取算法来检测所有物质峰；2)采用4D同位素聚类算法将检测到的物质峰按同位素和电荷状态进行聚类；其中，非靶向筛查包括：1)建立全氟和多氟烷基物质的结构数据库，得到PFASs数据库；2)将物质峰在PFASs数据库中进行匹配识别；3)过滤假阳性匹配结果；4)直链PFAS结构确认；5)异构体发现；6)基于离子淌度对异构体进行进一步的过滤。

2.根据权利要求1所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(1)中，水样前处理的方法为：将水样的pH调节至2～3，然后使用玻璃纤维滤膜过滤。

3.根据权利要求1所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(1)中，萃取的方法为：使用固相萃取仪将水样过固相萃取小柱进行萃取。

4.根据权利要求3所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(1)中，过固相萃取小柱的方法包括以下步骤：1)活化：将小柱安放在固相萃取仪上，依次用氨水甲醇溶液和甲醇溶液活化小柱；2)平衡：用稀硝酸酸化至pH＝2～3的超纯水对小柱进行平衡；3)水样过柱；4)洗脱：用乙酸钠缓冲溶液洗去杂质，再依次用甲醇和氨水甲醇)洗脱吸附在小柱上的PFASs污染物；5)浓缩：将洗脱液在温和的氮气流下吹至近干，加入甲醇复溶，然后离心；吸取上清液，即为浓缩液。

5.根据权利要求1所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(2)中，超高效液相色谱的检测条件为：色谱柱为ACQUITY BEH C18柱；柱温为35±5℃；流速：为0.3mL/min。

6.根据权利要求5所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(2)中，梯度洗脱流动相为：流动相A为含2mM乙酸铵的95％超纯水，流动相B为含2mM乙酸铵的95％甲醇，质谱检测液相流动相梯度如下：

7.根据权利要求1所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(2)中，离子淌度-四级杆飞行时间质谱仪的检测条件：离子源为ESI，检测模式为HDMSE，电离模式为负离子模式，质量扫描范围为50-1700m/z；离子源温度为120℃，脱溶剂气温度为500～550℃；毛细管电压为2.5kV；锥孔电压为40V，低碰撞能量为6eV；高碰撞能量为10-50eV。

8.根据权利要求1所述的全氟和多氟烷基物质异构体非靶向筛查方法，其特征在于，步骤(3)中，将物质峰在PFASs数据库中进行匹配识别并对假阳性结果过滤的方法为：使用质量筛查功能将物质峰在数据库中进行匹配，一级质量匹配误差小于10ppm，同位素匹配误差小于30％，碎片匹配误差小于5mDa；为了避免遗漏潜在的异构体，如果多个物质峰对应同一个分子式，则保留所有的匹配结果，对于具有相同m/z的物质峰，要保留的最小相对强度阈值设置为0.001；为了避免遗漏潜在的异构体，如果多个物质峰对应同一个分子式，则保留所有的匹配结果；根据分子式元素组成及碎片信息对匹配结果进行进一步过滤，以去除潜在的假阳性结果；其中，同位素匹配误差要小于30％；从导入的结构中产生预测碎片与碎片进行匹配，碎片匹配误差小于5mDa，并且允许匹配得分低于8。