[发明专利]一种具有抗氧化作用的珍珠多肽提取物及其制备方法

说明书

本发明涉及功能活性物质提取技术领域，特别涉及一种具有抗氧化作用的珍珠多肽的提取。本发明采用超声辅助醋酸提取及Sephadex G‑25凝胶过滤柱分离纯化等方法制备珍珠多肽提取物，所得珍珠多肽提取物包含有氨基酸序列如SEQ ID NO.1~5所示的肽段，分析测定表明，本发明珍珠多肽提取物具有显著的抗氧化能力，可在低浓度下有效清除羟自由基和ABTS自由基。此外，本发明制得的珍珠多肽提取物提取率和纯度高，可广泛用于食品、生物医药和化妆品领域。

技术领域

本发明涉及功能活性物质提取技术领域，特别涉及一种具有抗氧化作用的珍珠多肽的提取。

背景技术

人体氧化是一个不可逆转的过程。自由基，是机体氧化反应中产生的有害化合物，它具有强氧化性，可损害机体的组织和细胞，进而引起慢性疾病及衰老效应等。自由基清除剂即抗氧化剂，是一种能够消除氧化过程产生的对身体带来损害的物质。正常人体有一套清除自由基的系统，但系统能力随着年龄增长、体质改变等因素而减弱，自由基会在细胞内不断积累，细胞在不断的氧化过程中失去它们的机能最后死亡，甚至引发一系列疾病的发生。但通过一些食物和特种营养素的补充，可以帮助人体实现抗氧化，甚至以达到延长寿命的效果。

珍珠（Pearl）自古以来就深受人们的喜爱，既可作为珍贵的装饰品又能入药、护肤，具有清热解毒、安神镇定、美颜生肌、抗氧化与延缓衰老等功效。研究表明，珍珠发挥功效作用的主要成分是其中的小分子多肽。相对于成本高且安全性低的药物，珍珠来源的海洋生物活性肽，具有高活性、专一性和稳定性等优点，以珍珠为原料制备具有抗氧化作用的多肽有着巨大的市场潜力。然而珍珠的主要成分为95%左右的无机质碳酸钙，有机成分主要是蛋白质和多糖，蛋白含量仅为5%。从珍珠中如何高效制备具有抗氧化功效的活性肽一直是困扰产业发展的瓶颈问题。

专利CN112390848A公开了一种珍珠粉多肽类提取物的制备方法，该方法采用常温醋酸溶液提取，获得了得率为1.5%～1.8%、纯度为40.05%～45.61%的珍珠粉多肽类提取物，在300 mg/mL高浓度下羟基自由基清除力为75.25%～80.76%。该专利公开的方法存在珍珠粉多肽得率低、纯度不高、结构组成不明、提取物抗氧化作用差等缺点。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种具有抗氧化作用的珍珠多肽提取物及其制备方法，由该方法制备的珍珠多肽提取率和纯度高，主要成分明确，抗氧化效果好，可广泛用于食品、生物医药和化妆品领域。

首先，本发明提供了一种具有抗氧化作用的珍珠多肽提取物，所述珍珠多肽提取物中包括具有SEQ ID NO.1~5所示氨基酸序列的肽段。

本发明提取到的珍珠多肽提取物分子量小于2kDa，通过LC-MS/MS鉴定分析得出了本发明提取到的珍珠多肽提取物里面含量较高的5条肽段，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1~5所示，相对分子质量依次为：1122.4829、719.37147、984.45526、976.509031、953.0571，相对百分含量依次为：29.75%、12.99%、5.38%、5.31%、4.12%。通过分析测定珍珠多肽对羟自由基和ABTS自由基清除能力的影响，发现珍珠多肽具有突出的抗氧化能力，可有效清除羟自由基和ABTS自由基，其清除能力与日常常用抗氧化剂VC效果接近，具体的，在5mg/mL的低浓度时，即可清除97.97%羟自由基和79.05%的ABTS自由基。

其次，本发明还提供了上述珍珠多肽提取物的制备方法，包括以下步骤：

（1）提取：将珍珠粉与醋酸混合后搅拌，超声辅助提取，磁力搅拌，抽滤除去不溶物，旋转蒸发除去醋酸，得到珍珠多肽浓缩液；

（2）透析：将珍珠多肽浓缩液进行透析，冷冻干燥后得到珍珠粗多肽；

（3）纯化：将珍珠粗多肽复溶于去离子水，过膜得到珍珠粗多肽复溶液，后用Sephadex G-25凝胶过滤柱分离纯化，冷冻干燥，得到珍珠多肽提取物。