[发明专利]一种利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法有效
| 申请号： | 202211527243.1 | 申请日： | 2022-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN115777536B | 公开（公告）日： | 2023-08-18 |
| 发明（设计）人： | 何东林;张宗铭;谭艳平;邹家辉;李欣芳 | 申请（专利权）人： | 中南民族大学;湖北鄂达生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人： | 高剑锋 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 白花 前胡 建立 高效 再生 体系 方法 | ||
1.一种利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于包括以下步骤：
步骤1.茎的切割处理：选出白花前胡的茎，消毒后切成长度1.0cm的茎段，在茎段外切割2～4条纵向的创口，所述纵向是从茎段的一端到茎段的另一端的方向，所述创口整体均匀环绕着茎段切割，每条创口均延伸至茎段的端部；每条创口的深度大于茎表皮的厚度，每条创口的深度小于茎段直径的三分之一，每条创口的长度小于茎段长度的四分之一；
步骤2.诱导、继代培育：将经过步骤1切割处理后的茎段放入愈伤组织诱导培养基，所述愈伤组织诱导培养基为1/2MS+NAA 0.4mg/L+TDZ 0.1mg/L+植物凝胶3.5g/L+蔗糖35g/L，光照条件为黑暗或弱光，培养3周后进行继代培养，继代培养基为1/2MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.2mg/L+植物凝胶3.5g/L+蔗糖40g/L，光照条件为黑暗或弱光，继代培养时间为1～2周，得到白花前胡愈伤组织；
步骤3.分化培养：将经过步骤2培养形成的愈伤组织切分为0.5cm3的小方块，再接种到分化培养基，所述分化培养基为1/2MS+6-BA 0.8mg/L+NAA 0.2mg/L+植物凝胶3.5g/L+蔗糖40g/L，光照时长为12h/d，培养时间为4～5周，得到白花前胡丛生芽；
步骤4.生根培养：经过步骤3培养形成的丛生芽的芽苗长至2-3cm时、将其从基部切下成为单芽，再接种到生根培养基，所述生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+植物凝胶3g/L+蔗糖40g/L，光照时长为12h/d，培养时间为5～6周，得到生根的白花前胡无菌组培苗。
2.根据权利要求1所述的利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于：步骤1中消毒是先用75％乙醇消毒10min、无菌水冲洗3～5次，再用8％次氯酸钠消毒15min、无菌水冲洗3～5次。
3.根据权利要求1所述的利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于：步骤2中培养基的pH为5.8～6.0，1/2MS是指基础培养基为1/2MS培养基。
4.根据权利要求1所述的利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于：步骤3中培养基的pH为5.8～6.0，温度为25℃，空气相对湿度为40％～60％，光照强度为1500～2000lx。
5.根据权利要求1所述的利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于：步骤4中培养基的pH为5.8～6.0，温度为25℃，空气相对湿度为40％～60％，光照强度为1500～2000lx。
6.根据权利要求1所述的利用白花前胡的茎建立高效再生体系的方法，其特征在于：步骤4中基部是茎与根交界的部分。
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