[发明专利]一种帕罗西汀半抗原和人工抗原及其制备方法与应用

说明书

本发明公开一种帕罗西汀半抗原和人工抗原及其制备方法与应用。以2‑羟基帕罗西汀为前体合成化学结构式(Ⅰ)帕罗西汀半抗原和化学结构式(Ⅱ)帕罗西汀人工抗原，得到的抗原的免疫原性和反应原性好，进行动物免疫时易获得相应的抗体，并且可用于制备帕罗西汀胶体金检测产品。

技术领域

本发明涉及帕罗西汀检测领域，尤其涉及一种帕罗西汀半抗原和人工抗原及其制备方法与应用。

背景技术

帕罗西汀(Paroxetine)为5-HT再摄取抑制剂类抗抑郁药(SSRIs)，能选择性抑制5-羟色胺(5-HT)的再摄取，提高神经突触间隙内5-HT的浓度，从而产生抗抑郁作用。它只微弱地抑制去甲肾上腺素与多巴胺的再摄取。本药不与肾上腺素α1、α2或β受体发生作用，也不与多巴胺D2或组胺H1受体结合，不抑制单胺氧化酶。本药可广泛分布于各种组织和器官，仅1％出现在体循环中。蛋白结合率高达95％。药物经肝脏P450同工酶代谢。帕罗西汀大部分经肾随尿排出；约36％由粪便排出；也可经乳汁排泄。帕罗西汀是SSRI类里面最强再摄取剂，但是它也是唯一一个具有轻微抗胆碱作用的药物。

为药物滥用需要，医务人员可通过检测尿液中的帕罗西汀，以帮助诊断帕罗西汀依赖性和帕罗西汀的康复性。目前，常用到高效液相色谱法(HPLC)、液质联用技术(LC-MS)方法等对帕罗西汀有关物质检测。该方法分离分析能力强，灵敏度高，结果可靠、精确，但结构复杂，对环境的温度、湿度要求高，维护成本高。质谱仪是高精密仪器，需要经过专门培训的技术员才可以操纵，且测试速度慢，因此不利于对药物滥用检测的广泛推广。因此，需要开发一种简便高效的帕罗西汀物质检测方法。

发明内容

本发明的第一个目的是为了克服现有技术下使用HPLC、LC-MS检测帕罗西汀对仪器及操作人员要求高，不易推广，其检测速度慢的问题，提供一种帕罗西汀人工半抗原，可特异性识别帕罗西汀。

一种帕罗西汀半抗原，其分子结构式如式(Ⅰ)所示，

2-羟基帕罗西汀分子中没有活性基团可以连接载体蛋白，因此对其进行修饰，连上合适的间隔臂使其产生羧基或者氨基，以便于偶连载体蛋白。

本发明的第二个目的是提供一种帕罗西汀人工半抗原的制备方法，采用如下技术方案：

步骤(1)、将2-羟基帕罗西汀溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)，再加入三乙胺和二碳酸二叔丁酯，45-50℃下加热回流，反应完全后将反应液冷却至常温，减压蒸干溶剂，得到油状物A；

步骤(2)、将油相物质A溶于吡啶中，然后加入戊二酸酐和4-二甲氨基吡啶(DMAP)，98-100℃下加热回流，反应完全后将反应液冷却至常温，减压蒸干溶剂，得到油状残渣；将油状残渣加入二氯甲烷，分别用纯化水和饱和NaCl洗涤，收集二氯甲烷相，干燥，过滤，减压蒸干得油状物B；

步骤(3)、将油状物B溶于HCl与1，4-二氧六环的混合溶液中，98-100℃下加热搅拌回流，减压蒸干溶剂得油状物C；

步骤(4)、将油状物C溶于苯，置于冰水浴中，加入三氟乙酸酐，常温搅拌一段时间后置于78-81℃下加热搅拌回流，反应完全后将反应液转干分离得油状物D，即帕罗西汀人工半抗原。

作为优选，步骤(1)中，2-羟基帕罗西汀与三乙胺和二碳酸二叔丁酯的摩尔比为1：2：2；

作为优选，步骤(1)中，反应温度为45℃，反应时间为14.5-16h，更为优选为15h；

作为优选，步骤(2)中，油状物A、戊二酸酐和4-二甲氨基吡啶(DMAP)的摩尔比为(10-12)：(4-5.5)：(1-2)，更为优选为10：5：1；

作为优选，步骤(2)中，反应温度为100℃，反应时间为16-19h，更为优选为18h；