[发明专利]一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺

说明书

本发明涉及牛血清技术领域，具体公开了一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，去激素血清的制备工艺如下：S1：取预混合的牛血清加入离心管中，离心管底含有预处理的活性炭；S2：对离心管内的牛血清进行震荡处理；S3：对震荡均匀的牛血清进行水浴处理，水浴期间定期震荡；S4：水浴后的牛血清进行离心处理；S5：重复S2‑S4的步骤一次；S6：使用微米滤器过滤S5处理后的牛血清，得到去激素血清；通过活性炭吸附结合相关工艺，能够将胎牛血清中的激素降到极低的水平，在细胞培养验证中，用本发明专利的方法生产的去激素胎牛血清优于进口去激素胎牛血清。

技术领域

本发明涉及牛血清技术领域，具体涉及一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺。

背景技术

血液中包含血浆和血细胞，血液去除血细胞和纤维蛋白后即为血清，血清的主要作用是运载血细胞，运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等，血清相当于结缔组织的细胞间质，血清是血液的重要组成部分，呈淡黄色液体(因含有胆红素)，血清的化学成分中，水分占90％至92％，其他10％以溶质血浆蛋白为主，新生牛血清约有3.5-5％的蛋白。血清中还有离子、营养素、酶类、激素类、胆固醇和其他重要组成部分。

牛血清是生物医药生产、生命科学细胞研究和诊断试剂中一个重要的原材料。牛血清的稳定生产、供应涉及到生物医药生产的安全、稳定；支持了生命科学细胞研究、诊断试剂结果的重现性。细胞培养体系包括细胞、牛血清、培养基、培养方式，牛血清是细胞培养体系中的重要组成部分。在生命科学研究中，一些细胞系对牛血清中激素敏感，需要将这些激素去掉(或者说降低到一定水平以下)，血清和培养基配合才能培养好这类细胞。

目前在科研及制药企业研究乳腺癌等肿瘤时，需要培养对雌激素敏感及不敏感的肿瘤细胞系或原代肿瘤细胞做一些药物筛选、机理研究。去激素胎牛血清或新生牛血清在这些研究肿瘤细胞的过程中就非常重要，需要血清生产企业能够生产激素背景极低的胎牛血清或新生牛血清。

胎牛血清的激素含量本底很低，胎牛通过六联袋封闭采血，凝血后离心，上清为牛血清。每袋牛血清标记好来源、采血时间和操作人员。送到生产工厂后，取出采血管中牛血清进行质检，先进行病毒、抗体等多个指标的筛选。筛选合格的原料，通常用100头胎牛的原料血清进行预混合，低温充分混合后，原料低温(10-15℃)放置过夜。预混合后的血清，取部分血清过滤质检。本发明提供的工艺用活性碳吸附牛血清中的激素，吸附掉激素的牛血清，去掉活性炭，牛血清再经过辐照、过滤、分装、再次辐照后得到胎牛血清或新生牛成品。

我们用胎牛血清原料生产的去激素胎牛血清用乳腺癌细胞增殖和连续传代跟进口去激素胎牛血清进行比较，用本发明专利方法生产的去激素胎牛血清优于进口去激素胎牛血清。

发明内容

本发明的目的在于提供一种去激素牛血清的制备及生产方法，能够生产激素背景极低的胎牛血清或新生牛血清；

为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明第一个方面公开了一种去激素胎牛血清和新生牛血清的制备工艺，制备工艺的具体步骤如下：

S1：取预混合的牛血清加入离心管中，离心管底含有预处理的活性炭；

S2：对离心管内的牛血清进行震荡处理；

S3：对震荡均匀的牛血清进行水浴处理，水浴期间定期震荡；

S4：水浴后的牛血清进行离心处理；

S5：重复S2-S4的步骤一次；

S6：使用微米滤器过滤S5处理后的牛血清，得到去激素血清。

优选地，S1中加入500ml预混合的牛血清。

优选地，S3中牛血清在25℃水浴2小时或56℃水浴30min。