[发明专利]基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，包括：侧链上具有茎环结构序列的DNA四面体以及修饰在所述DNA四面体上的连接基团和捕获基团，所述连接基团用于与电极偶联，所述捕获基团用于捕获电化学探针；

所述miRNA检测传感器的检测原理为：在存在目标miRNA、电化学探针和双链特异性核酸酶的体系中，所述miRNA检测传感器中的茎环结构序列与目标miRNA特异性杂交反应打开DNA四面体的结构，DNA四面体中与目标miRNA杂交部分的DNA序列被双链特异性核酸酶降解，释放的目标miRNA用于循环反应，DNA四面体上暴露出捕获基团，捕获基团捕获体系中的电化学探针，通过对体系进行电化学信号测量实现目标miRNA含量的检测。

2.根据权利要求1所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，所述连接基团为巯基或生物素或其他可以与电极界面作用的基团。

3.根据权利要求1所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，所述电化学探针为银纳米颗粒或铜纳米颗粒或其他具备电化学响应信号的材料。

4.根据权利要求3所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，所述捕获基团为氨基或巯基或其他可以与所述电化学探针结合的基团。

5.根据权利要求4所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，所述miRNA检测传感器的组装方法为：将等体积的四种探针：Probe TA、Probe TB、ProbeTC、Probe TD加入到氯化钠和磷酸盐缓冲液的混合液中，加热到95℃，反应5min，得到所述miRNA检测传感器。

6.根据权利要求5所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器，其特征在于，其中的四种探针：Probe TA、Probe TB、Probe TC、Probe TD的序列如下：

Probe TA的序列为：

5’-SH-C₆-ACATTCCTAAGTCTGAAACATTACAGCATGCTACACGAGA AGAGCCACCATAGTA-3’；

Probe TB的序列为：

5’-TATCACCAAGCAGTTGACAGTGTAGCAAGCTGTAATAGATGCGAGGTAGGTTGAACTATACAACCTACTACCTCA-3’；

Probe TC的序列为：

5’-SH-C₆-TCAACTGCATGGTGATAAAACGACACTACGTGGGAATCTA CTATGGAGGCTCTTC-3’；

Probe TD的序列为：

5’-SH-C₆-TTTCTCGCATTTCAGACTAAGGAATGTGCTTCCCACGAAG TGTCGTTTTGAGGTA-NH2-3’；

目标miRNA的序列为：5’-UGAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU-3’。

7.一种基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测试剂盒，其特征在于，其包括如权利要求1-6中任意一项所述的miRNA检测传感器、电化学探针和双链特异性核酸酶。

8.根据权利要求7所述的基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测试剂，其特征在于，所述连接基团为巯基基团，所述电化学探针为银纳米颗粒，所述捕获基团为氨基。