[发明专利]一种基于荧光定量PCR检测胃梭菌的引物探针组合及其试剂盒和应用

权利要求书

1.一种基于荧光定量PCR技术检测胃梭菌的引物探针组合，其特征在于，所述用于检测胃梭菌的引物探针靶向胃梭菌的高度保守序列构建得到，所述胃梭菌的高度保守序列为胃梭菌的16S rRNA基因。

2.如权利要求1所示基于荧光定量PCR技术检测胃梭菌的引物探针组合，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如下：

正向引物：5′-CGTAGGTGGCAAGCGTTAT-3v(SEQ ID.NO.1)；

反向引物：5′-GGAATGCAGCTCCAAGTTA-3′(SEQ ID.NO.2)；

所述探针的核苷酸序列如下：

5′-AAATATCGCCTACGCTCCCTTTACGC-3′(SEQ ID.NO.3)。

3.如权利要求1所示基于荧光定量PCR技术检测胃梭菌的引物探针组合，其特征在于，所述探针的核苷酸序列的5’端还包括荧光报告基团；所述探针的核苷酸序列的3’端还包括荧光猝灭基团。

4.如权利要求1所示基于荧光定量PCR技术检测胃梭菌的引物探针组合，其特征在于，所述荧光报告基团包括FAM基团；所述荧光猝灭基团包括TAMRA-N基团。

5.一种基于荧光定量PCR技术检测胃梭菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1～4任一项所述引物探针组合。

6.如权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照和阴性对照，所述阳性对照为含有靶基因序列的质粒；所述阴性对照为DEPC水。

7.如权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为含有胃梭菌标准株Clostridium ventriculi DSM 286基因序列的大肠杆菌DH-5α质粒。

8.如权利要求5所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测样本包括粪便、肛拭子、唾液、胃粘液和血液。

9.权利要求5所述试剂盒在胃梭菌检测中的应用。

10.一种利用权利要求5所述试剂盒检测胃梭菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

提取待测样本的核酸；利用权利要求5所述试剂盒对所述核酸进行荧光定量PCR扩增，综合荧光通道曲线及Ct值判断待测样本是否含有胃梭菌。