[发明专利]癌症标志物定量检测的微流控芯片及检测方法

权利要求书

1.癌症标志物定量检测的微流控芯片，其特征在于，包括衬底和芯片层，所述衬底位于所述芯片层的正上方，所述衬底通过印章的印制形成有图案化适配体阵列，所述图案化适配体阵列的适配体一端修饰为荧光基团，当适配体与癌症标志物发生特异性结合时，适配体结构及荧光强度发生改变。

2.如权利要求1所述的癌症标志物定量检测的微流控芯片，其特征在于：所述衬底为玻璃，所述芯片层为PDMS，所述衬底和所述芯片层通过键合方式形成微流控芯片，所述键合方式为氧等离子体表面处理。

3.如权利要求2所述的癌症标志物定量检测的微流控芯片，其特征在于：所述印章为PDMS印章，所述PDMS印章为间隔设置的矩形凸起，在玻璃表面形成图案化3-氨丙基三乙氧基硅烷后，所述衬底和所述芯片层通过键合方式形成微流控芯片。

4.如权利要求1所述的癌症标志物定量检测的微流控芯片，其特征在于：所述芯片层通过微加工形成内部通道，所述内部通道包括树形通道和直线通道，所述树形通道为弧形结构及平滑的正余弦弯曲结构，用于层层稀释癌症标志物，形成癌症标志物的浓度梯度，所述直线通道用于固定图案化适配体阵列来捕获树形通道形成的不同浓度的癌症标志物。

5.癌症标志物定量检测方法，其特征在于，包括:

将二硅烷聚乙二醇、活性酯聚乙二醇生物素、链霉亲和素及癌症标志物的适配体依次注入键合好的微流控芯片中使得其内部形成图案化适配体阵列；

其中，图案化适配体阵列中适配体结构为发卡结构，发卡结构的下端为寡核苷酸直链。

6.如权利要求5所述的癌症标志物定量检测方法，其特征在于，还包括：

将淬灭剂注入到微流控芯片中，获得后续癌症标志物的荧光检测结果。

7.如权利要求6所述的癌症标志物定量检测方法，其特征在于，还包括：

将癌症标志物标准品注入微流控芯片中，适配体和癌症标志物标准品发生特异性结合，适配体结构由发卡结构变为任意的螺线圈结构，使得淬灭基团和荧光基团的距离变远，超过淬灭基团的作用范围，荧光强度增强，通过荧光显微镜获取图案化荧光图像，并使用图像处理软件得到图案化荧光图像的荧光强度，最终通过计算取得癌症标志物浓度与荧光强度的标准曲线；

将获得的标准曲线用于样本中癌症标志物的浓度检测，通过分析加入样本后的荧光强度得到样本中癌症标志物的浓度，对癌症标志物进行定量检测。