[发明专利]一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统

权利要求书

1.一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，包括：

池塘清理模块，用于对池塘清理消毒并完成进水工作；

水生动物投放模块，用于对日本对虾、梭子蟹、硬壳蛤和黑鲷鱼的投放；

微藻投放模块，用于对微藻的投放；

活性检测模块，用于对日本对虾肝胰腺中GST、SOD、CAT以及LZM的活性检测；

检测模块，用于对日本对虾抗菌肽基因的检测。

2.根据权利要求1所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述微藻的投入量为1升/亩，每20天投放一次。

3.根据权利要求1所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾肝胰腺中GST、SOD、CAT以及LZM的活性检测时，首先取不同实验组以及对照组日本对虾的肝胰腺样本，称重，放入研磨管中，加入9倍体积的0.86％冷生理盐水，将研磨管放入样品匀质仪中匀浆两次，得到10％组织匀浆，将制备好的10％组织匀浆以2000r/min的速度离心15min，收集上清液。

4.根据权利要求3所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾肝胰腺中GST的活性检测，包括以下步骤：

收集上清液以测定GST活性，GST活性的检测使用谷胱甘肽—S转移酶试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时412nm处的样本吸光度，按照公式计算组织中GST活力；

其中，样本匀浆蛋白浓度的检测使用总蛋白测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时595nm处测量样本的吸光度。

5.根据权利要求3所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾肝胰腺中SOD的活性检测，包括以下步骤：

收集上清液，使用0.86％冷生理盐水稀释5倍，至2％组织匀浆浓度，SOD活性的检测使用总超氧化物歧化酶测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时550nm处的样本吸光度，按照公式计算组织中SOD活力；

其中，样本匀浆蛋白浓度的检测使用总蛋白测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时595nm处测量样本的吸光度。

6.根据权利要求3所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾肝胰腺中CAT的活性检测，包括以下步骤：

收集上清液，使用0.86％冷生理盐水稀释5倍，至2％组织匀浆浓度，CAT活性的检测使用过氧化氢酶测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时405nm处的样本吸光度，按照公式计算组织中CAT活力；

其中，样本匀浆蛋白浓度的检测使用总蛋白测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时595nm处测量样本的吸光度。

7.根据权利要求3所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾肝胰腺中LZM的活性检测，包括以下步骤：

收集上清液，使用0.86％冷生理盐水稀释2倍，至5％组织匀浆浓度，LZM活性的检测使用溶菌酶测试盒，使用分光光度计测定反应结束时530nm处的样本透光度，按照公式计算组织中LZM含量；

其中，样本匀浆蛋白浓度的检测使用总蛋白测定试剂盒，使用分光光度计测定反应结束时595nm处测量样本的吸光度。

8.根据权利要求1所述的一种适合滩涂咸水池塘的多营养层级生态养殖系统，其特征在于，所述用于对日本对虾抗菌肽基因的检测时，在日本对虾养殖基地进行实验，设置对照组池塘与实验组池塘，对照组池塘的日本对虾正常投喂，实验组投喂添加微藻的饲料，喂养足够时间后，取对照组，实验组池塘中健康日本对虾成体，取肠道组织，提取RNA，反转录合成cDNA，设计引物，后续使用RT-qPCR检测日本对虾肠道内抗菌肽基因表达。