[发明专利]热稳定性提高的D-氨甲酰水解酶突变体及其在D-氨基酸合成中的应用

权利要求书

1.一种热稳定性提高的D-氨甲酰水解酶突变体，其特征在于，所述D-氨甲酰水解酶突变体是以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的D-氨甲酰水解酶为亲本，分别将其第138、202、204、208、277及284位的氨基酸进行突变。

2.根据权利要求1所述的D-氨甲酰水解酶突变体，其特征在于，所述D-氨甲酰水解酶突变体为将亲本的第138位点的谷氨酸Glu突变为色氨酸Trp或丝氨酸Ser；或，

将亲本的第202位点的丝氨酸Ser突变为脯氨酸Pro；或，

将亲本的第204位点的丝氨酸突变为天冬氨酸Asp或天冬酰胺Asn；或，

将亲本的第208位点的谷氨酸Glu突变为天冬氨酸Asp；或，

将亲本的第277位点的精氨酸Arg突变为亮Leu、谷氨酰胺Gln或谷氨酸Glu；或，

将亲本的第284位点的组氨酸His突变为苏氨酸Thr或天冬酰胺Asn。

3.根据权利要求1所述的D-氨甲酰水解酶突变体，其特征在于，所述D-氨甲酰水解酶突变体为将亲本的第202位点的丝氨酸Ser突变为脯氨酸Pro，并将第208位的谷氨酸Glu突变为天冬氨酸Asp，并将第277位的精氨酸Arg突变为亮Leu。

4.一种权利要求1～3任一项所述D-氨甲酰水解酶突变体的编码基因。

5.一种携带权利要求4所述编码基因的表达载体。

6.一种表达权利要求1～3任一项所述D-氨甲酰水解酶突变体的基因工程菌。

7.根据权利要求6所述基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是以大肠杆菌为宿主。

8.权利要求1～3任一项所述D-氨甲酰水解酶突变体或权利要求6所述基因工程菌在制备D-氨基酸中的应用。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述应用是以N-氨甲酰-D-氨基酸为底物，以所述D-氨甲酰水解酶突变体或所述基因工程菌为催化剂，催化生成D-氨基酸。

10.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述催化的条件是38～42℃，150～250rpm。