[发明专利]一种代代花黄酮及其制备方法与在制备减肥药物中的应用

说明书

本发明涉及一种代代花黄酮及其制备方法与在制备减肥药物中的应用，代代花黄酮(CAVAF)通过对代代花的花粉进行提取、分离、梯度洗脱和筛选组分制成，为黄酮含量最高的30％组分。本发明首次发现CAVAF对高脂饮食诱导的肥胖小鼠具有一定的抑制体重增长、改善胰岛素耐量、抑制白色脂肪细胞增长等作用，且用药剂量比较低，在有效用药剂量范围内毒性较低。

技术领域

本发明涉及天然产物提取与分离技术领域，具体涉及一种代代花黄酮及其制备方法与在制备减肥药物中的应用。

背景技术

肥胖是一种慢性疾病，是可损害健康的、异常或过量的脂肪累积。在过去的三十年中，肥胖人数翻了两番。目前世界上有20亿超重人群，并且这个数字仍在快速增长。对肥胖的担忧在全球范围内日益增长，不仅因为肥胖会影响一个人的外表，而且还会引起与肥胖相关的各种合并症，发病率很高，包括2型糖尿病(T2DM)、高血压、，冠状动脉粥样硬化性心脏病、神经退行性疾病和癌症等。因此，肥胖被美国医学会等组织认定为一种疾病状态，并已成为一个全球性的健康问题。肥胖的临床管理主要有三个方面：生活方式干预、减肥药物、减重手术。在临床应用中，可行的治疗药物，如奥利司他、氯卡塞林、芬特明和纳曲酮，作为食欲抑制剂、脂肪吸收抑制剂、，产热刺激剂等用于体重管理。然而，由于副作用或严重并发症(例如肾损伤)，临床治疗效果并不尽如人意。比如长期食用奥利司他会对肠胃产生不良影响，如腹泻、肠胃气胀、急性肾损伤、肝脏损伤、尿失禁等。

代代(Citrus aurantium L.var.amara Engl)是芸香科柑橘属植物酸橙的一个变种，代代花是其花蕾的干品，具有良好的药理作用，代代花中强心苷和非强心苷等苷类化合物含量较多，同时富含维生素，氨基酸，纤维素，矿物质和香豆素类等，常用于治疗气郁不舒、脘腹胀痛、积食不化、恶心呕吐等。代代花化学成分种类繁多，主要包括黄酮类，生物碱类和挥发油。代代花具有药食两用的价值，天然、安全、高效、副作用小，极有可能被开发成新型的减肥药物，但目前国内外对代代花的研究主要以其挥发油类化合物为主，而对代代花其它有效成分的研究报道几乎没有。代代花黄酮类化合物含量丰富，主要包括橙皮苷、新橙皮苷和柠橡皮素等，但目前，代代花黄酮的提取方法不一，提取成分不同、得率不高。

发明内容

为了克服现有技术的不足和缺点，本发明的目的在于提供一种代代花黄酮，通过对代代花的花粉进行提取、分离、梯度洗脱制成洗脱组分，黄酮含量最高的30％洗脱组分即为代代花黄酮。

本发明还提供了一种代代花黄酮的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

(1)提取：

将花粉粉碎过筛，用80％乙醇加热回流提取，再离心，将上清液减压浓缩，干燥，得到提取物；

(2)纯化：

将提取物溶于水并静置，吸取上清液加入AB-8大孔树脂柱中，依次用水，30％、50％、70％和95％的乙醇溶液冲洗AB-8大孔树脂柱，收集合并各组分，减压浓缩，真空干燥，即得洗脱组分，测定洗脱组分的黄酮含量，黄酮含量最高的30％洗脱组分即为代代花黄酮。

优选的，步骤(1)中，加热回流温度为70～80℃，加热回流时间为2～4h，加热回流次数为2～4次。

优选的，步骤(1)中，花粉和80％乙醇的质量比为1:15～1:30。

优选的，步骤(1)中，离心转速为4000～5000r/min，离心时间为8～12min，干燥温度为40～60℃，减压浓缩温度为40～50℃。

优选的，步骤(2)中，减压浓缩温度为40～60℃，测定黄酮含量的方法为NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH比色法。

本发明还提供了该制备方法制备得到的代代花黄酮在制备减肥药物中的应用。