[发明专利]一种防治柑橘黄龙病病菌药剂筛选方法

说明书

本发明涉及一种防治柑橘黄龙病病菌药剂筛选方法，涉及农林科学领域，利用栽培在含有营养液的水溶液中的感染黄龙病病菌的柑橘苗，向所述的含有营养液的水溶液里面根施筛选的药剂，培养至少20天，后通过检测柑橘苗残留的药剂浓度，及通过PCR检测柑橘苗黄龙病病菌的数量，以此来评价药效。本发明提出用水培法来进行筛选防治柑橘黄龙病病菌药剂，而且该方法简便、快速有效，20到40天内就可以筛选出有效药剂。

技术领域

本发明涉及农林科学领域，具体涉及一种防治柑橘黄龙病病菌药剂筛选方法。

背景技术

柑橘是世界第一大水果，面积和产量均居全球第一。我国的柑橘产业宏大，自2008年开始柑橘产业迅速发展，面积达到3046.2万亩，产量达到2331.26万吨，首次名列世界第一。据统计2020年广西柑橘种植面积864.93万亩、产量1382.09万吨、产值346.45亿元，已是全国第一，但目前广西柑橘产业的发展面临严重挑战，造成这个局面主要原因还是与黄龙病有关。

柑橘黄龙病菌(CandidatusLiberibacter，Ca.L)属于α–变型菌纲(α-Proteobacteria)韧皮部杆菌属(Liberibacter)，是一种韧皮部专性寄生的革兰氏阴性细菌，目前无法分离培养的病原菌。其引起的柑橘黄龙病是世界范围内严重危害柑橘生产的重要病害之一。柑橘黄龙病菌可以感染所有柑橘品种和柑橘杂交种等芸香科植物，在柑橘生长周期的各个阶段都能被其感染，并最终导致树木死亡。

柑橘黄龙病与柑橘溃疡病一样都属于细菌性病害，目前由于其病原无法像溃疡病在实验室里能够分离出来，造成无法用常规的方法来筛选药剂，当然这也与黄龙病所为害的地方有关。至今为止，由于没有有效的筛选药剂的方法，柑橘黄龙病的防治方法只能停留在“种无病苗、防木虱、砍病树”的初级阶段，造成很多感病的柑橘产区种植面积锐减，种植者的利益受到极大的影响，严重阻碍了柑橘产业的发展。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种防治柑橘黄龙病病菌药剂筛选方法。目的是提出用水培法来进行筛选防治柑橘黄龙病病菌药剂，而且该方法简便、快速有效，20到40天内就可以筛选出有效药剂。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种防治柑橘黄龙病病菌药剂筛选方法，其包括如下步骤：利用栽培在含有营养液的水溶液中的感染黄龙病病菌的柑橘苗，向所述的含有营养液的水溶液里面根施筛选的药剂，培养至少20天，后通过检测柑橘苗残留的药剂浓度，及通过PCR检测柑橘苗黄龙病病菌的数量，以此来评价药效。

本发明的有益效果是：本发明采用栽培在含有营养液的水溶液中的感染黄龙病病菌的柑橘苗的作为评价材料，通过在所述的含有营养液的水溶液里面根施筛选的药剂，只需通过检测柑橘苗残留的药剂浓度，及通过PCR检测柑橘苗黄龙病病菌的数量来评价药效，在20-40天即可筛选出有效抗柑桔黄龙病病菌的化学药剂。且提供的快速、有效的抗黄龙病病菌化学药剂筛选方法，筛选得到的高效柑桔黄龙病病菌防控药剂，可在生产上直接用于柑桔黄龙病病菌的化学防治药剂，还可为防治柑桔黄龙病病菌的新型药剂的研究与开发提供理论参考。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，其包括如下具体的步骤：

步骤1，苗木接毒：把栽培在含有营养液的水溶液中的没有感染黄龙病病菌的柑橘苗接种黄龙病病菌，得到感染黄龙病病菌的柑橘苗；

步骤2，根施药剂：将步骤2得到的感染黄龙病病菌的柑橘苗的含有营养液的水溶液里面根施筛选的药剂，在光照强度3000-4000lux，环境温度25±2℃条件下，培养至少20天，得到待检测的柑橘苗；

步骤3，药效评价：检测步骤2得到的待检测的柑橘苗的根部及顶叶的残留的药剂浓度，及通过PCR检测柑橘苗的根部及顶叶的黄龙病病菌的数量，以此来评价药效。