[发明专利]一种小麦族物种Ns基因组特异KASP分子标记引物及其应用

权利要求书

1.一种华山新麦草Ns染色体特异KASP分子标记引物，其特征在于，该分子标记引物包含两个引物组，分别为引物组KP1A-440448839和引物组KP4D-349184744，所述的两个引物组分别包含F-FAM、F-HEX、R三条引物，所述引物组KP1A-440448839包含的引物，其核苷酸序列依次分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述引物组KP4D-349184744包含的引物，其核苷酸序列依次分别如SEQ ID NO.4、SEQID NO.5和SEQ ID NO.6所示。

2.一种华山新麦草Ns染色体的基因分型方法，其特征在于，该方法采用如权利要求1所述的KASP分子标记引物对待测株系的基因组DNA进行PCR扩增。

3.根据权利要求2所述的基因分型方法，其特征在于，所述的PCR扩增条件如下：

PCR反应体系为10μL：200ng/μL的DNA模板1μL，10μM的混合引物1.4μL，2×KaspMasterMix 5μL，ddH₂O 2.6μL；

PCR反应程序为：95℃10min；95℃20s，61℃45s，10个循环，每个循环降低0.6℃；95℃20s，55℃45s，32个循环；25℃1min；95℃20s,55℃40s，3个循环；30℃30s。

其中，所述混合引物的体系为100μL：包含F-FAM和F-HEX引物各12μL，R引物30μL，H₂O 46μL。

4.一种用于鉴定华山新麦草Ns染色体的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含如权利要求1所述的KASP分子标记引物。

5.如权利要求1所述的KASP分子标记引物在以下任意一种中的应用：

①检测华山新麦草Ns染色体；

②检测含有华山新麦草Ns染色体的产品；

③追踪华山新麦草Ns染色体；

④追踪含有华山新麦草Ns染色体的产品；

⑤分子标记辅助选择育种；

⑥制备分子标记辅助选择育种的产品；

⑦小麦分子育种；或

⑧制备小麦分子育种的产品。