[发明专利]一种基于检测尿液中代谢物含量评估机体衰老程度的方法及其应用

权利要求书

1.一种基于检测尿液中代谢物含量评估机体衰老程度的方法，其特征在于，所述方法为检测尿液中酒精非氧化代谢产物的含量，再根据含量评估机体衰老程度。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酒精非氧化代谢产物为乙基葡萄糖醛酸苷和硫酸二乙酯。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测尿液中酒精非氧化代谢产物之前需口服摄入含酒精浓度为2-10％的酒精饮品10-50ml。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述酒精饮品为啤酒、果酒、鸡尾酒中的任一种或几种。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测含量的方法为液质联用检测法、酶联免疫法、指示剂法以及试纸法中的任一种或几种。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述液质联用检测法包括如下步骤：

(1)收集尿液前禁食10-14h；

(2)将尿液以2500-3500转/分钟的速度离心15-20min后取上清液；

(3)采用0.22μm滤膜对上清液进行过滤，分装，得样品，-80℃保存备用；

(4)将步骤(3)备用样品上样到液相色谱柱上，通过液质联用检测法同步对EtG和EtS进行定性定量检测。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(4)中所述液质联用检测法的液相色谱条件为：色谱柱为C18或C8键合相色谱柱，规格为50-150mm×1-4.6mm,粒径为1.7-5μm；流动相A为0.1％甲酸乙腈溶液，流动相B为0.1％甲酸水溶液；采用梯度洗脱程序，流动相的流速为0.1-2.0mL/min；柱温为：40℃；进样量：5μl。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(4)中所述液质联用检测法的质谱条件包括乙基葡萄糖醛酸苷一级质谱条件和硫酸二乙酯一级质谱条件：

其中乙基葡萄糖醛酸苷一级质谱条件为母离子：221.20m/z，子离子：75/84.9m/z；驻留时间：90-100ms；干燥气体：120；热表面诱导去溶剂质谱接口温度：320℃；雾化气：220；电喷雾负离子模式电压：-4500V；辅助加热器温度：450℃；

多元反应监测条件：221.20/75入口电压：-9；碰撞室入口电压：40；碰撞能量：21；221.20/84.9入口电压：-2；碰撞室入口电压：36；碰撞能量：25；

硫酸二乙酯一级质谱条件为母离子：124.9m/z，子离子：80/97m/z；驻留时间：90-100ms；干燥气体：120；热表面诱导去溶剂质谱接口温度：300-320℃；雾化气：220；电喷雾负离子模式电压：-4500V；辅助加热器温度：450℃；

多元反应监测条件：124.9/80入口电压:-17；碰撞室入口电压：52；碰撞能量：46；124.9/97入口电压：-8；碰撞室入口电压：28；碰撞能量：21。

10.根据权利要求1-9任意一项所述的方法在评估机体衰老程度方面中的应用。