[发明专利]一种吖啶酯标记物稳定剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种吖啶酯标记复合物稳定剂，组分包含氨基酸0.1‑1％、蛋白稳定剂0.1‑2.0％、防腐剂0.01‑0.1％、添加剂0.01‑0.1％、螯合剂0.01‑0.1％、表面活性剂0.05‑0.2％，缓冲液余量。本发明还公开了吖啶酯标记复合物稳定剂的制备方法。本发明能够解决吖啶酯在溶液中易水解、不稳定的问题，对吖啶酯标记复合物起到保护作用，提高了稳定性，同时延长了使用的有效期，并且该稳定剂能够应用到体外诊断试剂盒中。

技术领域

本发明涉及吖啶酯标记物，尤其涉及一种吖啶酯标记物稳定剂及其制备方法。

背景技术

吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质，目前广泛应用于体外诊断技术当中。在碱性条件下，吖啶酯分子受到过氧化氢攻击生成二氧乙烷，分解为二氧化碳和电子激发态的N-甲基吖啶酮，当其回到基态时会发出波长为430nm的光。利用这一性质，用吖啶酯标记抗原或抗体后，在碱性条件下以一个稳定的酰胺键与蛋白质结合形成吖啶化合物，加激发剂激活后发光，通过标准光度计收集光子来检测标记化合物。吖啶酯化学发光体系用属于直接发光闪光型，发光时间短小于2秒，可以实现快速检测且背景低、标记效率高，但是在具体实施过程中，吖啶酯标记物并没有想象的稳定，在一般的缓冲液中易水解，出现试剂不稳定的情况。结合物稀释至工作浓度时，由于结合物在稀释液中浓度的降低所引起的试剂稳定性下降，从而导致试剂的保存期缩短。由于保存稀释液效果不好，在长期保存过程中，保护性降低，试剂的稳定性也大大降低。从体外诊断试剂行业市场来看，吖啶酯标记物的稳定性好坏直接影响试剂盒整体的性能指标，因此研制一种合适的稳定剂至关重要。

发明内容

本发明的目的之一提供一种吖啶酯标记复合物稳定剂，能够解决吖啶酯在溶液中易水解、不稳定的问题，对吖啶酯标记复合物起到保护作用，提高了稳定性，同时延长了使用的有效期，并且该稳定剂能够应用到体外诊断试剂盒中。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种吖啶酯标记复合物稳定剂，其组分包含氨基酸0.1-1％、蛋白稳定剂0.1-2.0％、防腐剂0.01-0.1％、添加剂0.01-0.1％、螯合剂0.01-0.1％、表面活性剂0.05-0.2％，缓冲液余量。

所述氨基酸为赖氨酸、丝氨酸或甘氨酸，用于降低吖啶酯复合物降解。

所述蛋白稳定剂为质量百分比为0.5-2.0％的牛血清白蛋白、0.1-1.0％的酪蛋白以及牛IgG中的一种或两种的混合物。

所述防腐剂为Bro、Proclin 300和洗必泰其中的一种或两种以上的混合物。

所述添加剂为0.9％的氯化钠、和0.1-1％的聚乙二醇6000其中的一种或两种混合物。其中，NaCl提供离子强度，聚乙二醇6000含羟基化合物有稳定蛋白质作用。

所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、和二乙基三胺五乙酸(DTPA)中的一种或两种的混合物。其中，螯合剂能螯合金属离子，防止蛋白质变性。

所述表面活性剂为吐温-20(Tween-20)、乙基苯基聚乙二醇(NP-40)、和曲拉通X-100(Triton X-100)中的一种或两种以上的混合物。其中，表面活性剂还能降低吖啶酯复合物的碰撞聚集，起稳定性作用。

所述缓冲液为浓度0.2mol/L的磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、MES缓冲液或Tris-HCl缓冲液。

本发明目的之二是提供吖啶酯标记复合物稳定剂的制备方法。

具体地，吖啶酯标记复合物稳定剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)按以下取氨基酸0.1-1％、蛋白稳定剂0.1-2.0％、防腐剂0.01-0.1％、添加剂0.01-0.1％、螯合剂0.01-0.1％、表面活性剂0.05-0.2％，缓冲液余量；